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骨質(zhì)疏松小鼠模型骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞特性的研究

發(fā)布時(shí)間:2024-04-10 03:42
  目的探討骨質(zhì)疏松小鼠模型骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)生物學(xué)特性的改變。方法通過(guò)皮下注射地塞米松構(gòu)建小鼠骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型(OP組),同時(shí)設(shè)立對(duì)照(NC組),分離OP組及NC組骨髓MSCs進(jìn)行體外培養(yǎng);通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面分化抗原;運(yùn)用CKK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖活力;通過(guò)脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平;運(yùn)用堿性磷酸酶(ALP)活性檢測(cè)、油紅O染色及Western blot法檢測(cè)兩組細(xì)胞成骨分化及脂肪分化能力。結(jié)果經(jīng)過(guò)骨組織學(xué)檢測(cè)證明模型建立成功,體外培養(yǎng)OP組及NC組骨髓MSCs細(xì)胞形態(tài)無(wú)差異。OP-MSCs細(xì)胞表面分化抗原Scal1及CD44為陽(yáng)性, CD34及CD11b為陰性,與NC-MSCs相似,但OP-MSCs增殖活力下降(P<0.05);此外兩組細(xì)胞凋亡水平類似(P>0.05)。成骨分化誘導(dǎo)7 d后OP-MSCs的ALP活性顯著低于對(duì)照組(P<0.01),21 d后礦化小結(jié)明顯減少(P<0.001);脂肪分化誘導(dǎo)8 d后OP-MSCs形成更多脂滴(P<...

【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及材料
    1.2 方法
        1.2.1 動(dòng)物模型建立:
        1.2.2 骨組織學(xué)檢測(cè):
        1.2.3 MSCs分離培養(yǎng):
        1.2.4 流式細(xì)胞術(shù):
        1.2.5 細(xì)胞增殖測(cè)定:
        1.2.6 細(xì)胞凋亡測(cè)定:
        1.2.7 細(xì)胞分化誘導(dǎo):
        1.2.8 Western blot:
        1.2.9 堿性磷酸酶(ALP)活性檢測(cè):
        1.2.10 茜素紅染色:
        1.2.11 油紅O染色:
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 骨質(zhì)疏松小鼠模型建立及檢測(cè)
    2.2 OP-MSCs的干細(xì)胞表面分化抗原表達(dá)水平檢測(cè)
    2.3 OP-BMSCs的增殖能力檢測(cè)
    2.4 OP-MSCs的凋亡水平檢測(cè)
    2.5 OP-MSCs的多向分化能力檢測(cè)
    2.6 OP-MSCs中成骨細(xì)胞及脂肪細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)水平
3 討論



本文編號(hào):3950093

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