目的:建立一個操作簡單、重復(fù)性好、可靠性高的脊柱軸線力學(xué)失穩(wěn)誘導(dǎo)椎間盤退變的小鼠模型并對其進(jìn)行評價。方法:通過手術(shù)去除小鼠棘上和棘間韌帶致其脊柱軸線力學(xué)失穩(wěn)來誘導(dǎo)構(gòu)建椎間盤退變(IDD)模型,并于造模后不同時間點收集腰椎樣本,通過番紅O/固綠染色觀察IDD過程中椎間盤形態(tài)學(xué)改變,免疫組化法檢測椎間盤基質(zhì)代謝相關(guān)蛋白(Col1,Col2和基質(zhì)降解酶Mmp13)和Hif信號關(guān)鍵蛋白(Hif1α,Vegf)在椎間盤組織中的表達(dá)模式變化,對模型進(jìn)行評價。結(jié)果:椎間盤番紅O/固綠染色表明,對照組椎間盤組織形態(tài)結(jié)構(gòu)完整,內(nèi)外層纖維環(huán)排列整齊,細(xì)胞外基質(zhì)染色均勻;而IDD模型組纖維環(huán)出現(xiàn)撕裂、纖維排列紊亂等狀況,番紅O染色變淺。免疫組化結(jié)果表明,對照組椎間盤纖維環(huán)中Col1,Col2,Mmp13在正常椎間盤中均有表達(dá)。與對照組比較,模型組纖維環(huán)中Col2表達(dá)顯著降低,而Col1和Mmp13表達(dá)均顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。Hif信號檢測發(fā)現(xiàn),在正常椎間盤組織中,Hif1α于外側(cè)纖維環(huán)中呈低表達(dá),后期表達(dá)逐漸降低,而Vegf表達(dá)于纖維環(huán)和髓核組織;與對照組比較,造模4周IDD模型...

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圖1IDD模型中椎間盤的大體影像學(xué)改變

通常情況下,椎間盤高度的下降與IDD程度正相關(guān)。μCT結(jié)果表明:與對照組比較,IDD造模8周后模型組的椎間盤高度明顯下降(見圖1)。通過對椎間盤平均高度進(jìn)行分析(黑色線段標(biāo)識處)表明,IDD模型組平均高度是對照組的83%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。2.2IDD模型中椎間....

圖2小鼠椎間盤番紅O/固綠染色(200×)

椎間盤是人體最大的封閉的無血管組織,低氧環(huán)境是椎間盤內(nèi)組織重要的生理環(huán)境[7,8]。臨床腰椎間盤退變組織HIF-1α檢測發(fā)現(xiàn),其在正常椎間盤中表達(dá)很少或幾乎不表達(dá),而在退變椎間盤內(nèi)陽性表達(dá)為45%,提示其與椎間盤的退變呈正相關(guān)。本研究中對Hif信號的免疫組織檢測表明,對照組Hif....

圖3IDD模型中椎間盤組織的基質(zhì)含量的變化(200×)

圖2小鼠椎間盤番紅O/固綠染色(200×)圖4IDD模型中Mmp13蛋白表達(dá)的變化(200×)

圖4IDD模型中Mmp13蛋白表達(dá)的變化(200×)

圖3IDD模型中椎間盤組織的基質(zhì)含量的變化(200×)圖5IDD模型中Hif1α蛋白表達(dá)的變化(200×)

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