目的探討兔心包液內(nèi)的細胞成分及其分化潛能,為心包液細胞基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用提供形態(tài)學(xué)依據(jù)。方法成年新西蘭大白兔30只,無菌開胸,用輸液針軟管抽取心包液,離心培養(yǎng)。取不同培養(yǎng)代次細胞,倒置顯微鏡下行細胞形態(tài)觀察。利用免疫熒光技術(shù)對心包液細胞進行免疫顯色,觀察CD44、CD45、波形蛋白(vimentin)的表面標記。取第3代細胞進行成骨、成脂誘導(dǎo)。利用PCR技術(shù)檢測CD44、CD45、vimentin相關(guān)分子表達情況及分析表達量的差異。結(jié)果成年兔心包液中含有形態(tài)較為均勻、生長狀態(tài)良好、增殖能力強的細胞群。免疫熒光結(jié)果顯示,CD44、vimentin陽性表達,不表達CD45。成脂和成骨誘導(dǎo)后,可向成骨和成脂細胞分化。結(jié)論兔心包液中含有多項分化潛能的細胞,它們可能對心肌修復(fù)具有積極意義。

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圖1原代至第3代心包液細胞形態(tài)，倒置顯微鏡觀察標尺示100μm

心包液是漿膜性心包分泌的漿液，其生理性組成和血漿超濾液基本一致，但其低密度脂蛋白水平顯著高于血清，心包液中蛋白含量是血清中蛋白含量的60%[4]。Fujita等[1]認為，心包液可反映缺血后心肌周圍分子環(huán)境中發(fā)生的即時變化，可以作為重要的臨床研究對象。心包液富含外泌體，通過對心包....

圖2倒置熒光顯微鏡下觀察，第3代心包液細胞表面標記CD44、CD45、vimentin的表達免疫熒光染色標尺示100μm

圖1原代至第3代心包液細胞形態(tài)，倒置顯微鏡觀察標尺示100μm本研究利用體外細胞培養(yǎng)技術(shù)，對兔心包液的細胞進行分離、培養(yǎng)，證明兔心包液中存在細胞成分。利用CD44和vinentin免疫標記后，至少存在兩個細胞亞群———CD44+細胞亞群和vimentin+細胞亞群。一般認為，v....

圖3倒置顯微鏡觀察第3代兔心包液細胞成脂和成骨分化

本研究利用體外細胞培養(yǎng)技術(shù)，對兔心包液的細胞進行分離、培養(yǎng)，證明兔心包液中存在細胞成分。利用CD44和vinentin免疫標記后，至少存在兩個細胞亞群———CD44+細胞亞群和vimentin+細胞亞群。一般認為，vimentin是成纖維細胞的標記物，因此，本實驗結(jié)果提示，兔心包....

圖4RT-PCR和Real-timePCR檢測CD44、vimentin、CD45基因表達，CD44與vimentinmRNA相對表達量的比較CD44與vimentinmRNA相對表達量比較，*P<0.05

圖3倒置顯微鏡觀察第3代兔心包液細胞成脂和成骨分化CD45分子在所有白細胞上都有表達，稱為白細胞共同抗原(leukocytecommonantigen,LCA)，是一類結(jié)構(gòu)相似、分子量較大的跨膜蛋白，是細胞膜上信號傳導(dǎo)的關(guān)鍵分子，在淋巴細胞的發(fā)育成熟，功能調(diào)節(jié)及信號傳遞中具....

本文編號：3943316