細胞周期的正常運行，尤其是有絲分裂期的一系列復(fù)雜而精細事件的調(diào)控，是保證基因組穩(wěn)定性的關(guān)鍵[1]。遺傳物質(zhì)在復(fù)制后，經(jīng)過有絲分裂期的染色體的正確分離，平均地分給子代細胞。DNA損傷普遍存在于整個細胞周期，當DNA發(fā)生損傷時，正常細胞可以激活相應(yīng)的周期檢查點，延緩或阻滯有絲分裂進程并啟動修復(fù)，待有效地完成修復(fù)后才繼續(xù)分裂[2,3]；如果檢查點失去正常功能或修復(fù)機制缺陷，受損的DNA帶著錯誤進入有絲分裂，傳到子代細胞，就引入了突變，突變隨著有絲分裂而累積，從而引起基因組不穩(wěn)定，最終導致腫瘤的發(fā)生[4-7]。 DNA雙鏈斷裂是最嚴重的一種DNA損傷，相比其他DNA損傷后果更嚴重，如果不得到修復(fù)，細胞將面臨染色體斷裂和死亡，不正確的修復(fù)又可能導致腫瘤的發(fā)生[8]。細胞為了應(yīng)對雙鏈斷裂，有兩條修復(fù)途徑：同源重組和非同源末端連接，兩條途徑共同維持細胞的基因組穩(wěn)定[1,9-12]。DNA損傷是腫瘤治療的常用手段，因此，DNA修復(fù)在腫瘤治療中至關(guān)重要。DNA修復(fù)缺陷會導致細胞對DNA損傷高度敏感[13]，但當DNA修復(fù)能力異常增強，則導致腫瘤耐受DNA損傷刺激，即產(chǎn)生耐藥[14,15]。同時，DNA修...

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【學位級別】：博士

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縮略詞表
摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1.材料及來源
        1.1 質(zhì)粒和細胞
        1.2 主要試劑和抗體
    2. 實驗方法
        2.1 質(zhì)粒構(gòu)建
        2.2 細胞培養(yǎng)
        2.3 免疫共沉淀（co-IP）
        2.4 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
        2.5 siRNA 轉(zhuǎn)染
        2.6 流式細胞術(shù)分析周期
        2.7 免疫熒光染色
        2.8 Western Blot 蛋白印跡
結(jié)果
    1. siRNA 文庫篩選影響細胞有絲分裂的基因
        1.1 USP19 敲低導致細胞有絲分裂指數(shù)（MI）升高
        1.2 USP19 敲低導致染色體分離錯誤
    2. USP19 敲低對 DNA 損傷應(yīng)答及修復(fù)的影響
        2.1 USP19 受 DNA 損傷誘導表達
        2.2 USP19 在 DNA 損傷過程中被 ATM/ATR 磷酸化
        2.3 USP19 敲低影響 DNA 損傷應(yīng)答通路中的蛋白磷酸化
        2.4 USP19 敲低影響 DNA 雙鏈斷裂修復(fù)
    3. USP19 與 HDAC1，HDAC2 存在相互作用
    4. USP19 與腫瘤發(fā)生發(fā)展
討論
參考文獻
結(jié)論
文獻綜述
    參考文獻
個人簡歷
致謝



本文編號：3937285