肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae,MP)是兒童常見的社區(qū)獲得性肺炎(Community acquired pneumonia,CAP)的主要病原體,可引起非典型性肺炎及一系列并發(fā)癥。本研究旨在從臨床樣本中分離培養(yǎng)MP菌株,并從中篩選保護(hù)力強(qiáng)和安全性好的MP分離株作為疫苗候選株,為人用肺炎支原體疫苗的研制奠定基礎(chǔ)。本研究通過比較不同培養(yǎng)基及添加物對(duì)MP生長(zhǎng)速度及CCU的影響篩選培養(yǎng)基;再添加不同抗生素及采用濾膜過濾等幾種預(yù)處理方法去除雜菌,對(duì)富集時(shí)間進(jìn)行摸索以建立肺炎支原體分離培養(yǎng)方法。結(jié)果發(fā)現(xiàn)以含20%馬血清作為添加物時(shí),0.5%葡萄糖的SP-4培養(yǎng)基可使MP生長(zhǎng)速度快,菌量多;再加入終濃度為500 U/mL青霉素G,2.5 U/mL多粘菌素B,2.5μg/mL兩性霉素及0.0025%醋酸鉈時(shí)能有效抑制雜菌生長(zhǎng)但不會(huì)明顯抑制支原體的生長(zhǎng);后依次采用0.45 μm及0.22 μm孔徑濾膜過濾可去除大部分雜菌;咽拭子、痰樣本的富集時(shí)間分別為6-8 h及18-24 h分離效果最好。本研究最終從689個(gè)兒童咽拭子及痰樣本中分離到了 30株人肺炎支原體菌株,經(jīng)過RFLP方法...

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１幾種除菌方式對(duì)肺炎支原體分離效果的影響??

：：；：．；??（：：０．２２叫過濾處理后的１＾分離株（＞＜１〇〇）；??圖１幾種除菌方式對(duì)肺炎支原體分離效果的影響??Ｆｉｇｕｒｅ?１．?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｓｅｖｅｒａｌ?ｓｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎ?ｍｅｔｈｏｄｓ?ｏｎ?Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ?ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ?ｉｓｏｌａ....

圖７肺炎支原體分離株美藍(lán)還原實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖（４?ｄ）??Ｆｉｇｕｒｅ?７．?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ?ｂｌｕｅ?ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ?ｔｅｓｔ?ｆｏｒ?ｉｓｏｌａｔｅｓ?ｏｆ?Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ??

３．７．３．生化特性鑒定結(jié)果??本研究得到的分離株均可分解葡萄糖（圖５）；不水解精氨酸（圖６）；可還原??美藍(lán)（圖７），菌落表面可觀察到豚鼠紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象（圖８），符合人肺炎支原體??生化特性，因??圖５肺炎支原體分離株葡萄糖代謝實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖（４?ｄ）??Ｆｉｇｕｒｅ?５．?Ｅｘｐ....

圖６肺炎支原體分離株精氨酸發(fā)酵結(jié)果圖（１５?ｄ）??Ｆｉｇｕｒｅ?６．?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ａｒｇｉｎｉｎｅ?ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｉｓｏｌａｔｅｓ?ｏｆ?Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ?ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ?（１５?ｄ）??

中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院碩士生畢業(yè)論文??３．７．３．生化特性鑒定結(jié)果??本研究得到的分離株均可分解葡萄糖（圖５）；不水解精氨酸（圖６）；可還原??美藍(lán)（圖７），菌落表面可觀察到豚鼠紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象（圖８），符合人肺炎支原體??生化特性，因??圖５肺炎支原體分離株葡萄糖代謝實(shí)驗(yàn)....

圖５肺炎支原體分離株葡萄糖代謝實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖（４?ｄ）??Ｆｉｕｒｅ?５．?Ｅｘｅｒｉｍｅｎｔａｌ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆｇｌｕｃｏｓｅ?ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ?ｉｎ?ｉｓｏｌａｔｅｓ?ｏｆ?Ｍｙｃｏｌａｓｍａ??

中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院碩士生畢業(yè)論文??３．７．３．生化特性鑒定結(jié)果??本研究得到的分離株均可分解葡萄糖（圖５）；不水解精氨酸（圖６）；可還原??美藍(lán)（圖７），菌落表面可觀察到豚鼠紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象（圖８），符合人肺炎支原體??生化特性，因??圖５肺炎支原體分離株葡萄糖代謝實(shí)驗(yàn)....

本文編號(hào)：3931229