目的觀察一氧化氮供體硝普鈉(SNP)、一氧化氮合酶抑制劑(L-NAME)對(duì)體外炎性培養(yǎng)(IFN-γ刺激)成肌細(xì)胞/肌管NLRP3炎癥小體活化的影響。方法利用IFN-γ刺激小鼠C2C12成肌細(xì)胞/肌管,q PCR和Western blot分析炎性小體(ASC、NLRP3、caspase-1)的形成及活化、ELISA檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清IL-1β的分泌。進(jìn)一步利用L-NAME和SNP處理IFN-γ誘導(dǎo)的C2C12細(xì)胞/肌管,分析炎性小體的形成、活化及IL-1β的分泌。結(jié)果 IFN-γ刺激培養(yǎng)后,成肌細(xì)胞/肌管中NLRP3、ASC和mature-caspase-1表達(dá)水平上調(diào)(P<0.01)。較之未刺激的細(xì)胞,IFN-γ誘導(dǎo)會(huì)顯著上調(diào)成肌細(xì)胞/肌管培養(yǎng)基中的IL-1β濃度(P<0.01)。SNP處理后6 h,分化肌管(IFN-γ刺激48 h)內(nèi)炎性小體(ASC、NLRP3、caspase-1)mRNA和蛋白水平較單純刺激細(xì)胞顯著下調(diào)(P<0.01),L-NAME則上調(diào)ASC、NLRP3、caspase-1表達(dá)水平(P<0.05)。與上述結(jié)果一致,SNP和L-NAME處理同...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1. 1 材料
        1.1.1主要試劑
        1.1.2細(xì)胞
    1. 2 方法
        1.2.1細(xì)胞培養(yǎng)與分組
        1.2.2 RT-q PCR檢測(cè)ASC、NLRP3、caspase-1基因表達(dá)
        1.2.3 Western blot檢測(cè)ASC、NLRP3和caspase-1蛋白表達(dá)
        1.2.4 ELISA技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞上清中IL-1β表達(dá)
    1. 3 統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果
    2. 1 IFN-γ 對(duì)成肌細(xì)胞/ 分化肌管中ASC、NLRP3、caspase-1 表達(dá)的影響
    2. 2 SNP和L-NAME對(duì)IFN-γ 刺激48 h后分化肌管中ASC、NLRP3、caspase-1表達(dá)的影響
    2. 3IFN-γ 對(duì)成肌細(xì)胞/ 分化肌管培養(yǎng)基上清中IL-1β 的表達(dá)的影響及SNP和L-NAME對(duì)分化肌管培養(yǎng)基上清中IL-1β 的表達(dá)的影響
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