空腸彎曲桿菌是一種廣泛存在于食品和環(huán)境之中,對(duì)人類健康以及食品安全領(lǐng)域帶來的危害極為嚴(yán)重的常見腸道致病菌�？漳c彎曲桿菌感染會(huì)引起人腸道的炎癥反應(yīng),嚴(yán)重時(shí)會(huì)使人罹患免疫損傷性疾病格林巴利綜合征�；诳漳c彎曲桿菌的強(qiáng)致病性,本課題的研究核心在于研究空腸彎曲桿菌中與粘附和侵染有關(guān)的基因的功能。在空腸彎曲桿菌從畜牧產(chǎn)品以及環(huán)境中侵染人體的過程中,必然會(huì)受到各類離子,包括鎂離子的影響,因此本課題研究了空腸彎曲桿菌在不同濃度鎂離子耐受對(duì)其生長狀況和蛋白組表達(dá)方面的影響。研究表明,在高鎂離子濃度下(5 mg/mL,10mg/mL和20mg/mL),空腸彎曲桿菌的生長會(huì)受到抑制。在20mg/mL濃度下,空腸彎曲桿菌的存活率劇烈下降,生長嚴(yán)重滯后。在10mg/mL濃度下,生長性同樣存在明顯得滯后性,但是其存活率要高于在20 mg/mL的離子濃度下,略低于空白對(duì)照組。因此,下一步繼續(xù)利用10mg/mL離子濃度處理的空腸彎曲桿菌來對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞(HCT-8)進(jìn)行粘附侵染實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,I0mg/mL鎂離子處理的空腸彎曲桿菌對(duì)細(xì)胞的相對(duì)侵染率增高。之后利用DIA定量蛋白組學(xué)技術(shù)對(duì)10mg/mL濃度鎂離子處...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 空腸彎曲桿菌的簡介
        1.1.1 空腸彎曲桿菌的基本介紹
        1.1.2 空腸彎曲桿菌的致病機(jī)制
        1.1.3 外界條件改變對(duì)空腸彎曲桿菌粘附侵染的影響
    1.2 蛋白組學(xué)技術(shù)
        1.2.1 蛋白組學(xué)技術(shù)的簡介
        1.2.2 細(xì)菌定量蛋白組學(xué)技術(shù)及其優(yōu)缺點(diǎn)
    1.3 空腸彎曲桿菌蛋白組學(xué)研究現(xiàn)狀
    1.4 基因敲除
        1.4.1 基因敲除技術(shù)的分類及原理
        1.4.2 基因敲除技術(shù)在空腸彎曲桿菌中的應(yīng)用
    1.5 研究目的及意義
    1.6 研究內(nèi)容
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)所用菌株及細(xì)胞
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)所用試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)所用溶液及培養(yǎng)基
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 空腸彎曲桿菌的培養(yǎng)與保藏
        2.2.2 HCT-8細(xì)胞的培養(yǎng)與保藏
        2.2.3 空腸彎曲桿菌在不同鎂離子濃度下的生長狀況
        2.2.4 不同條件培養(yǎng)的空腸彎曲桿菌對(duì)細(xì)胞的粘附實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 不同條件處理之后空腸彎曲桿菌的比較蛋白組學(xué)研究
        2.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR (RT-PCR)
        2.2.7 空腸彎曲桿菌與粘附侵染有關(guān)基因的缺失
3 結(jié)果與討論
    3.1 空腸彎曲桿菌在不同鎂離子濃度下的生長情況
    3.2 不同條件處理的空腸彎曲桿菌對(duì)腸上皮細(xì)胞的粘附實(shí)驗(yàn)
    3.3 不同條件處理之后空腸彎曲桿菌的比較蛋白組學(xué)研究
        3.3.1 空腸彎曲桿菌總蛋白的定量與檢測
        3.3.2 定量數(shù)據(jù)分析
    3.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果
    3.5 基因敲除實(shí)驗(yàn)
        3.5.1 基因缺失載體的構(gòu)建
        3.5.2 基因缺失
4 結(jié)論
    4.1 全文總結(jié)
    4.2 論文的創(chuàng)新點(diǎn)
    4.3 論文的不足之處
5 展望
6 參考文獻(xiàn)
7 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文情況
8 致謝



本文編號(hào)：3859675