阪崎克羅諾桿菌(Cronobacter sakazakii)屬腸桿菌科,克羅諾桿菌屬,為革蘭氏陰性菌,菌株周生鞭毛,能運(yùn)動(dòng),無(wú)芽孢,兼性厭氧,是一類能夠在人和動(dòng)物腸道內(nèi)生存的機(jī)會(huì)性致病菌。阪崎克羅諾桿菌廣泛存在于環(huán)境和食物中,通過環(huán)境接觸和攝食等途徑進(jìn)入動(dòng)物和人體,感染阪崎克羅諾桿菌可能危及新生兒、嬰幼兒的生命,對(duì)老年人和免疫功能低下的成年人同樣具有較強(qiáng)的致病性,由于該菌對(duì)人類健康較強(qiáng)的危害性日益引起人們的廣泛關(guān)注,致病性和毒力因子是該菌的研究重點(diǎn)。阪崎克羅諾桿菌優(yōu)于其他致病菌的干燥環(huán)境耐受性使其能夠更長(zhǎng)時(shí)間存活于水分活度較低的食品中,增加了人類感染患病的風(fēng)險(xiǎn),但現(xiàn)有對(duì)于該菌的干燥環(huán)境耐受性機(jī)制的認(rèn)識(shí)和研究尚不完善,因此,本課題對(duì)食品基質(zhì)中分離得到的阪崎克羅諾桿菌展開了干燥環(huán)境耐受性機(jī)制研究和討論。課題對(duì)45株阪崎克羅諾桿菌進(jìn)行MLST分型后確定菌株分布于20個(gè)ST型,通過6天的菌株耐干燥性實(shí)驗(yàn)對(duì)各菌株干燥環(huán)境耐受性進(jìn)行評(píng)估,結(jié)合MLST分型結(jié)果分析分析發(fā)現(xiàn),阪崎克羅諾桿菌的耐干燥性與其所屬ST型無(wú)對(duì)應(yīng)關(guān)系。對(duì)耐干燥性較強(qiáng)和較弱菌株共4株菌株進(jìn)行1 h的干燥刺激,用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)1...

【文章頁(yè)數(shù)】：83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
1 前言
    1.1 研究背景
        1.1.1 克羅諾桿菌屬
        1.1.2 阪崎克羅諾桿菌
        1.1.3 阪崎克羅諾桿菌的耐干燥性研究
        1.1.4 阪崎克羅諾桿菌的菌膜
        1.1.5 阪崎克羅諾桿菌的分型研究
        1.1.6 細(xì)菌蛋白組學(xué)分析
    1.2 本課題的研究意義
    1.3 本課題主要研究?jī)?nèi)容
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)中主要使用的培養(yǎng)基和溶液的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 阪崎克羅諾桿菌的活化及培養(yǎng)
        2.2.2 阪崎克羅諾桿菌的MLST分型
        2.2.3 45株阪崎克羅諾桿菌的耐干燥性評(píng)估方法
        2.2.4 實(shí)時(shí)定量PCR(qRT-PCR)檢測(cè)與抗干燥環(huán)境相關(guān)基因干燥刺激前后表達(dá)量變化情況
        2.2.5 不同耐干燥性菌株干燥刺激前后菌株細(xì)胞形態(tài)觀察
        2.2.6 45株阪崎克羅諾桿菌的菌膜形成能力評(píng)估方法
        2.2.7 不同菌膜形成能力菌株形成菌膜的拉曼光譜檢測(cè)
        2.2.8 不同耐干燥性菌株的蛋白組學(xué)分析
3 結(jié)果與討論
    3.1 45株阪崎克羅諾桿菌的MLST分型結(jié)果
    3.2 45株菌株的耐干燥性評(píng)估結(jié)果
    3.3 不同耐干燥性菌株干燥刺激前后的細(xì)菌形態(tài)觀察觀察
    3.4 實(shí)驗(yàn)菌株的準(zhǔn)備和干燥刺激條件的優(yōu)化
    3.5 實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)不同耐干燥性菌株中10個(gè)相關(guān)基因干燥刺激前后表達(dá)量變化情況
    3.6 45株菌株的菌膜形成情況
    3.7 菌膜的拉曼光譜檢測(cè)
    3.8 不同耐干燥性菌株的蛋白組學(xué)分析
        3.8.1 蛋白提取結(jié)果
        3.8.2 LC-MS/MS TIC和Base Peak譜圖
        3.8.3 定量結(jié)果分析
        3.8.4 定量數(shù)據(jù)分析
4 結(jié)論
    4.1 課題總結(jié)
    4.2 論文創(chuàng)新點(diǎn)
    4.3 論文的不足之處
5 展望
6 參考文獻(xiàn)
7 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文情況
8 致謝



本文編號(hào)：3846302