目的探討糖氧剝奪/再灌注損傷(OGD/R)對人正常肝L02細(xì)胞自噬水平的影響。方法體外培養(yǎng)人正常肝L02細(xì)胞,制備OGD/R模型,模擬臨床的肝臟缺血再灌注損傷。分為5組:正常對照組、OGD 6 h/R 1、3、6、12 h組。隨后在倒置顯微鏡下觀察L02細(xì)胞形態(tài);采用MTT比色法檢測L02細(xì)胞的相對增殖情況;Western blot法檢測自噬相關(guān)蛋白LC3、Beclin-1和p62的表達(dá)變化。結(jié)果與正常對照組相比,隨著再灌注時(shí)間的延長,OGD/R組處理L02細(xì)胞的形態(tài)損傷逐漸加劇,增殖活性逐漸降低,呈時(shí)間依賴性。自噬相關(guān)蛋白LC3和Beclin-1在OGD 6 h/R 1 h即有所增高,隨著再灌注時(shí)間的延長,LC3的表達(dá)量逐漸增高并于再灌注6 h時(shí)大量增加,于再灌注12 h時(shí)達(dá)到最大值(P<0.01);Beclin-1蛋白的表達(dá)量隨再灌注時(shí)間的延長逐漸增加于6 h和12 h急劇增加(P<0.01);p62蛋白于OGD 6 h/R 1 h時(shí)和3 h無明顯變化,而在再灌注6 h時(shí)開始急劇增加,于12 h達(dá)到最大值(P<0.01)。結(jié)論 OGD/R可誘導(dǎo)人正常肝L02細(xì)胞自...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞及主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 OGD/R損傷模型的建立
        1.2.3 MTT法檢測細(xì)胞存活率
        1.2.4 Western blot法檢測自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、LC3、p62的表達(dá)水平
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 OGD/R損傷對人正常肝L02細(xì)胞形態(tài)的影響
    2.2 OGD/R損傷對人正常肝L02細(xì)胞增殖活性的影響
    2.3 OGD/R對人正常肝L02細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白Beclin-1表達(dá)的影響
    2.4 OGD/R對人正常肝L02細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3表達(dá)的影響
    2.5 OGD/R對人正常肝L02細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3、Beclin-1和p62的表達(dá)的影響
3 討論



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