當(dāng)前,細菌耐藥已經(jīng)成為嚴重的公共衛(wèi)生危機,嚴重威脅著人類的身體健康和生命安全,大有逐漸加重之勢,是人類面臨的亟待破解的難題。破解細菌耐藥盡管需要加大研發(fā)殺傷耐藥菌的新藥、合理使用抗菌藥物、適度補充益生菌等,但是這些措施似乎仍不能實現(xiàn)破解細菌耐藥的難題。導(dǎo)致這一局面的重要原因是這些基本防治對策不能抑制由細菌轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)和接合引起的細菌耐藥基因的水平傳播,以及由此引起的耐藥細菌的快速蔓延�；谏鲜黾毦退幍膰乐匦蝿菀约艾F(xiàn)有防治對策的分析,本研究試圖以肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化為模型,以肺炎鏈球菌標(biāo)準菌株為受體菌,以青霉素耐藥肺炎鏈球菌為供體菌,探究DNase干預(yù)肺炎鏈球菌青霉素耐藥基因轉(zhuǎn)移的作用,以便為深入研究切斷細菌耐藥基因水平傳播提供新的思路和方法。本研究方法分為四個基本階段。在第一實驗階段,主要對后續(xù)轉(zhuǎn)化和抑制轉(zhuǎn)化實驗中的受體菌及供體菌進行基本生物學(xué)性狀檢測,以便為后續(xù)實驗提供可靠的基本要素和有關(guān)數(shù)據(jù)。這些基本生物學(xué)性狀檢測主要包括受體菌及供體菌的optochin試驗、青霉素結(jié)合蛋白基因鑒定以及生長曲線測定;在第二實驗階段,為了給后續(xù)轉(zhuǎn)化和抑制轉(zhuǎn)化實驗提供含青霉素耐藥基因的外源性DNA和有關(guān)數(shù)據(jù),...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
    1 細菌耐藥機制的研究
        1.1 耐藥基因水平轉(zhuǎn)移研究
        1.2 細菌自然轉(zhuǎn)化的研究進展
            1.2.1 細菌轉(zhuǎn)化現(xiàn)象的研究
            1.2.2 肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化現(xiàn)象的研究
    2 肺炎鏈球菌對青霉素類耐藥的研究
        2.1 肺炎鏈球菌的概述及其危害
        2.2 青霉素簡介
        2.3 青霉素耐藥肺炎鏈球菌現(xiàn)狀
    3 DNase作用機理與臨床應(yīng)用的研究
        3.1 DNase作用機理
        3.2 DNase在臨床中的應(yīng)用
    4 本研究的目的與意義
第一章 肺炎鏈球菌鑒定與生長曲線測定
    1 試驗材料
        1.1 試驗菌株
        1.2 試驗儀器
        1.3 試驗藥品與試劑
    2 試驗方法
        2.1 肺炎鏈球菌的活化與純化
        2.2 肺炎鏈球菌形態(tài)學(xué)鑒定與生化鑒定
            2.2.1 肺炎鏈球菌形態(tài)學(xué)鑒定
            2.2.2 生化鑒定
            2.2.3 optochin試驗
        2.3 青霉素結(jié)合蛋白基因檢測
        2.4 肺炎鏈球菌生長曲線測定
    3 試驗結(jié)果
        3.1 肺炎鏈球菌鑒定結(jié)果
            3.1.1 肺炎鏈球菌形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果
            3.1.2 肺炎鏈球菌生化鑒定結(jié)果
            3.1.3 optochin試驗結(jié)果
        3.2 青霉素結(jié)合蛋白基因檢測結(jié)果
        3.3 肺炎鏈球菌生長曲線測定結(jié)果
    4 討論
第二章 提取青霉素耐藥肺炎鏈球菌DNA并進行相關(guān)鑒定
    1 試驗材料
        1.1 試驗菌株
        1.2 試驗儀器
        1.3 試驗藥品與試劑
    2 試驗方法
        2.1 青霉素耐藥肺炎鏈球菌和肺炎鏈球菌標(biāo)準菌株的活化
        2.2 青霉素耐藥肺炎鏈球菌DNA的提取
        2.3 肺炎鏈球菌標(biāo)準菌株和青霉素耐藥肺炎鏈球菌DNA的測序和分析
    3 試驗結(jié)果
        3.1 提取青霉素耐藥肺炎鏈球菌DNA以及相關(guān)鑒定的結(jié)果
        3.2 肺炎鏈球菌標(biāo)準菌株和青霉素耐藥肺炎鏈球菌DNA的測序和分析的結(jié)果
    4 討論
第三章 用外源性青霉素耐藥肺炎鏈球菌DNA轉(zhuǎn)化肺炎鏈球菌標(biāo)準菌株并進行相關(guān)鑒定
    1 試驗材料
        1.1 試驗菌株
        1.2 試驗儀器
        1.3 試驗藥品與試劑
    2 試驗方法
        2.1 肺炎鏈球菌標(biāo)準菌株的活化
        2.2 用外源性青霉素耐藥肺炎鏈球菌DNA轉(zhuǎn)化肺炎鏈球菌標(biāo)準菌株
        2.3 轉(zhuǎn)化后細菌懸液的optochin和苯唑西林藥敏試驗
        2.4 轉(zhuǎn)化后實驗組和對照組肺炎鏈球菌青霉素結(jié)合蛋白基因的測序與分析
    3 試驗結(jié)果
        3.1 肺炎鏈球菌標(biāo)準菌株optochin和苯唑西林藥敏試驗結(jié)果
        3.2 轉(zhuǎn)化后細菌懸液的optochin和苯唑西林藥敏試驗結(jié)果
        3.3 轉(zhuǎn)化后實驗組和對照組肺炎鏈球菌青霉素結(jié)合蛋白基因的測序與分析結(jié)果
    4 討論
第四章 DNase抑制青霉素耐藥肺炎鏈球菌DNA轉(zhuǎn)化肺炎鏈球菌標(biāo)準菌株并進行相關(guān)鑒定
    1 試驗材料
        1.1 試驗菌株
        1.2 試驗儀器
        1.3 試驗藥品與試劑
    2 試驗方法
        2.1 肺炎鏈球菌標(biāo)準菌株的活化
        2.2 DNase抑制青霉素耐藥肺炎鏈球菌DNA轉(zhuǎn)化肺炎鏈球菌標(biāo)準菌株
        2.3 DNase抑制轉(zhuǎn)化后細菌懸液的optochin和苯唑西林藥敏試驗
        2.4 DNase抑制轉(zhuǎn)化后實驗組和對照組肺炎鏈球菌青霉素結(jié)合蛋白基因的測序與分析
    3 試驗結(jié)果
        3.1 DNase抑制轉(zhuǎn)化后細菌懸液的optochin和苯唑西林藥敏試驗結(jié)果
        3.2 DNase抑制轉(zhuǎn)化后實驗組和對照組肺炎鏈球菌青霉素結(jié)合蛋白基因的測序與分析結(jié)果
    4 討論
實驗結(jié)論
致謝
參考文獻
縮略詞表
附錄



本文編號：3842673