目的:衰老是一個復雜的生命過程,是引起代謝性疾病最主要的原因之一。糖脂代謝功能紊亂與肝臟細胞的衰老有著密切的聯系。我們通過構建自然衰老模型,并且對中年大鼠進行了長期的飲食限制干預。探討了衰老對糖脂代謝的影響以及長期的飲食限制對衰老相關糖脂代謝的影響及其可能機制,初步探索了PP2A甲基化和GcK相關基因在其中可能的調控作用。方法:1.自然衰老及長期飲食限制模型建立(1)分組:年輕組(5個月齡),老齡組(27個月齡),飲食限制組(12月齡大鼠飲食限制15個月)。(2)體重觀察:每3個月測量一次。(3)大鼠肝臟組織切片HE染色觀察。2.飲食限制對衰老相關糖代謝的影響及其機制(1)使用便攜式血糖儀檢測大鼠禁食16h后及進食前后血糖值。(2)蒽酮法檢測肝臟糖原含量。(3)實時熒光定量PCR檢測糖異生相關基因Pc,PCK2,G6pc,PCK1。3.飲食限制對衰老相關脂代謝的影響及其機制(1)全自動血生化分析儀檢測血脂含量。(2)異丙醇提取肝臟甘油三酯并檢測大鼠肝臟甘油三酯含量。(3)實時熒光定量PCR檢測脂肪氧化相關基因PPara,Acot1和Acadl的mRNA表達量。4.年齡和飲食限制對PP2...

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【學位級別】：碩士

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引言
    1.衰老、飲食限制
    2.肝臟對糖脂代謝的調節(jié)作用
        2.1. 糖原代謝
        2.2、甘油三酯代謝
    3.PP2A與肝臟糖脂代謝
材料和方法
    1.材料
        1.1 實驗動物與飼料
        1.2 主要試劑
        1.3 引物
        1.4 主要儀器
        1.5 試劑配制
    2.方法
        2.1 動物飼養(yǎng)及分組
        2.2 臟器系數
        2.3 肝組織糖原含量的測定
        2.4 肝臟中甘油三酯的測定
        2.5 食物耐受性實驗
        2.6 血生化指標檢測
        2.7 肝組織HE染色
        2.8 肝組織RNA分離純化和q RT-PCR檢測基因表達量
        2.9 肝組織蛋白免疫印跡檢測基因蛋白表達量
        2.10 統計分析
結果
    1.自然衰老模型長期飲食限制模型建立
        1.1 年齡和飲食限制對大鼠體重的影響
        1.2 肝重和肝臟系數
        1.3 肝臟組織形態(tài)學變化
    2.飲食限制對衰老相關的糖代謝的影響
        2.1 空腹血糖及進食后血糖變化值
        2.2 年齡與飲食限制對肝糖儲備的影響
        2.3 飲食限制對衰老相關糖異生的影響
    3.飲食限制對衰老相關脂代謝的影響
        3.1 與飲食限制對血脂的影響
        3.2 肝臟甘油三酯的關系及飲食限制對其影響
        3.3 肝臟脂肪氧化的關系及飲食限制對其影響
    4.年齡和飲食限制對PP2A去甲基化狀態(tài)的影響
    5.年齡與飲食限制對Gck相關基因的影響
討論
結論
存在的問題
展望
綜述
參考文獻
附錄
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文



本文編號：3838198