目的:巨噬細(xì)胞Coronin-1(冠蛋白-1)與Mtb(結(jié)核分枝桿菌)逃逸巨噬細(xì)胞的殺傷有關(guān)。本研究構(gòu)建巨噬細(xì)胞特異性SP107-C3啟動子調(diào)控表達Coronin-1 si RNA的p S-EGFP-SP-Coronin-1質(zhì)粒,研究其特異性敲減巨噬細(xì)胞Coronin-1蛋白對RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬功能及抗恥垢分枝桿菌效應(yīng)的影響。方法:1.構(gòu)建pS-EGFP-SP-EGFP、pS-EGFP-SP-Coronin-1重組質(zhì)粒,分別轉(zhuǎn)染RAW264.7、A549及HEK293細(xì)胞,檢測其巨噬細(xì)胞特異性啟動表達si RNA的能力。2.以pS-EGFP-SP-Coronin-1重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞,用RT-PCR法和Western-blot兩種方法檢測重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染前后的RAW264.7細(xì)胞Coronin-1的表達水平,明確重組質(zhì)粒敲減Coronin-1的效率。3.用恥垢分枝桿菌分別感染pS-EGFP-SP-Coronin-1重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞、pS-EGFP-SP空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞和空白RAW264.7細(xì)胞,通過感染細(xì)胞內(nèi)恥垢分枝桿菌菌落總數(shù)評估巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)染質(zhì)粒前后對細(xì)菌的吞...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
摘要
Abstract
前言
第一部分 重組質(zhì)粒構(gòu)建
    1.材料和方法
    2.結(jié)果與分析
    3.結(jié)論
第二部分 重組質(zhì)粒功能鑒定
    1.材料和方法
    2.結(jié)果與分析
    3.結(jié)論
第三部分 重組質(zhì)�！凹�(xì)胞水平”抗分枝桿菌的研究
    1.材料和方法
    2.結(jié)果與分析
    3.結(jié)論
全文討論
全文總結(jié)
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的文章



本文編號：3815381