神經(jīng)細胞水腫是膽紅素腦病(bilirubin encephalopathy,BE)發(fā)生發(fā)展過程中的重要病理變化。水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP4)的表達及分布異常與多種疾病所致細胞毒性腦水腫的發(fā)生發(fā)展具有密切聯(lián)系。但膽紅素腦病中AQP4的表達變化規(guī)律及其在病理進展中的作用尚不清楚。采用7日齡SD大鼠小腦延髓池注射膽紅素溶液的方法,建立新生大鼠膽紅素腦病模型。膽紅素腦病模型根據(jù)膽紅素作用時間的不同,分為12 h、24 h、48 h、72 h和7 d組。采用HE及尼氏染色,檢測各新生大鼠腦組織的病理改變;應用透射電鏡(TEM),檢測膽紅素作用24 h后,鼠腦組織超微結(jié)構(gòu)的變化;應用免疫熒光及Western印跡,檢測AQP4在腦組織中的表達變化。通過上述實驗,以探討AQP4的表達變化與膽紅素所致腦損傷的關(guān)系。HE及尼氏染色結(jié)果顯示,隨著膽紅素沉積時間的延長,神經(jīng)細胞逐漸腫脹,細胞間隙增大,尼氏小體數(shù)量逐漸減少;電鏡結(jié)果顯示,膽紅素腦病24 h后神經(jīng)細胞線粒體出現(xiàn)腫脹;免疫熒光染色顯示,24 h組AQP4的表達范圍明顯增加,其后表達范圍逐漸減少,表達強度也隨之減弱;Wester...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 膽紅素溶液的制備
    1.3 實驗動物分組及膽紅素腦病鼠模型的復制
    1.4 動物模型的觀察和鑒定
    1.5 腦切片的制備及HE染色、尼氏染色
    1.6 電鏡樣品的制備
    1.7 腦蛋白質(zhì)樣品的制備及Western印跡檢測
    1.8 免疫熒光檢測
    1.9 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 膽紅素腦病動物模型出現(xiàn)行為異常
    2.2 動物建模24 h細胞形態(tài)學改變
    2.3 膽紅素處理24 h組神經(jīng)細胞超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)變化
    2.4 動物建模24 h AQP4表達量最高，并且主要表達于細胞膜
    2.5 動物建模24 h組AQP4表達量最多
3 討論



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