增生性瘢痕(hypertrophic scar,HTS)是由于皮膚受熱力或者其它因素?fù)p傷后,膠原纖維和其它細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)過(guò)度沉積所致。ECM的過(guò)度沉積導(dǎo)致纖維化的形成,常常引起患者美觀和功能上的嚴(yán)重?fù)p害。增生性瘢痕的發(fā)病機(jī)制已成為燒傷修復(fù)領(lǐng)域研究的重點(diǎn)。 我們?cè)谇捌谘芯恐羞x用含4096個(gè)人類基因的表達(dá)譜芯片對(duì)5例增生性瘢痕患者及自身正常皮膚進(jìn)行差異表達(dá)基因的篩選,發(fā)現(xiàn)P311基因高表達(dá)于新生的增生性瘢痕內(nèi);隨后利用酵母雙雜交技術(shù)篩選出β4-整合素結(jié)合蛋白(Integrin beta 4 binding protein,ITGB4BP)為其相互作用蛋白。不過(guò)P311對(duì)于Ⅰ型膠原蛋白和MMP-9等與ECM合成與代謝相關(guān)蛋白的影響不具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,因此我們轉(zhuǎn)而對(duì)ITGB4BP在成纖維細(xì)胞中的表達(dá)與功能進(jìn)行了初步探討。 Wnt信號(hào)通路參與調(diào)控細(xì)胞的分化、癌變、凋亡等生理病變過(guò)程。近幾年研究表明,Wnt信號(hào)通路的異常活化與皮膚纖維化的發(fā)生與進(jìn)展關(guān)系密切。本課題組前期研究表明,ITGB4BP可以調(diào)控皮膚成纖維細(xì)胞的胞外基質(zhì)生成,為深入研究其機(jī)制...

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫(xiě)詞表
第一章 緒論
    1.1 增生性瘢痕的研究概況
    1.2 ITGB4BP 蛋白的研究現(xiàn)狀
    1.3 Wnt/β-catenin 信號(hào)通路概述
    1.4 本課題的研究背景及意義
    1.5 本課題的主要研究?jī)?nèi)容
第二章 真核表達(dá)載體pCMV-ITGB4BP 的構(gòu)建
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 材料
        2.2.2 方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 皮膚組織總RNA 提取結(jié)果
        2.3.2 RT-PCR 結(jié)果
        2.3.3 連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化
        2.3.4 pCMV-ITGB4BP 重組載體PCR 及酶切鑒定
        2.3.5 pCMV-ITGB4BP 重組質(zhì)粒測(cè)序鑒定
    2.4 討論
第三章 ITGB4BP 對(duì) Wnt/β-catenin 信號(hào)通路活性影響的實(shí)驗(yàn)研究
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 材料
        3.2.2 方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 Western blot 檢測(cè)ITGB4BP 對(duì)細(xì)胞內(nèi)β-catenin 水平的影響
        3.3.2 激光共聚焦技術(shù)觀察β-catenin 在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)
        3.3.3 ITGB4BP 對(duì)TCF/LEF 轉(zhuǎn)錄活性的影響
    3.4 討論
結(jié)論與展望
    一、結(jié)論
    二、展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
答辯委員會(huì)對(duì)論文的評(píng)定意見(jiàn)



本文編號(hào)：3763395