β4整合素結合蛋白ITGB4BP對Wnt/β-catenin信號通路影響的研究
發(fā)布時間:2023-03-18 15:33
增生性瘢痕(hypertrophic scar,HTS)是由于皮膚受熱力或者其它因素損傷后,膠原纖維和其它細胞外基質(extracellular matrix,ECM)過度沉積所致。ECM的過度沉積導致纖維化的形成,常常引起患者美觀和功能上的嚴重損害。增生性瘢痕的發(fā)病機制已成為燒傷修復領域研究的重點。 我們在前期研究中選用含4096個人類基因的表達譜芯片對5例增生性瘢痕患者及自身正常皮膚進行差異表達基因的篩選,發(fā)現(xiàn)P311基因高表達于新生的增生性瘢痕內;隨后利用酵母雙雜交技術篩選出β4-整合素結合蛋白(Integrin beta 4 binding protein,ITGB4BP)為其相互作用蛋白。不過P311對于Ⅰ型膠原蛋白和MMP-9等與ECM合成與代謝相關蛋白的影響不具有明顯的統(tǒng)計學意義,因此我們轉而對ITGB4BP在成纖維細胞中的表達與功能進行了初步探討。 Wnt信號通路參與調控細胞的分化、癌變、凋亡等生理病變過程。近幾年研究表明,Wnt信號通路的異;罨c皮膚纖維化的發(fā)生與進展關系密切。本課題組前期研究表明,ITGB4BP可以調控皮膚成纖維細胞的胞外基質生成,為深入研究其機制...
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮寫詞表
第一章 緒論
1.1 增生性瘢痕的研究概況
1.2 ITGB4BP 蛋白的研究現(xiàn)狀
1.3 Wnt/β-catenin 信號通路概述
1.4 本課題的研究背景及意義
1.5 本課題的主要研究內容
第二章 真核表達載體pCMV-ITGB4BP 的構建
2.1 前言
2.2 材料與方法
2.2.1 材料
2.2.2 方法
2.3 實驗結果
2.3.1 皮膚組織總RNA 提取結果
2.3.2 RT-PCR 結果
2.3.3 連接產物的轉化
2.3.4 pCMV-ITGB4BP 重組載體PCR 及酶切鑒定
2.3.5 pCMV-ITGB4BP 重組質粒測序鑒定
2.4 討論
第三章 ITGB4BP 對 Wnt/β-catenin 信號通路活性影響的實驗研究
3.1 前言
3.2 材料與方法
3.2.1 材料
3.2.2 方法
3.3 實驗結果
3.3.1 Western blot 檢測ITGB4BP 對細胞內β-catenin 水平的影響
3.3.2 激光共聚焦技術觀察β-catenin 在細胞內的表達
3.3.3 ITGB4BP 對TCF/LEF 轉錄活性的影響
3.4 討論
結論與展望
一、結論
二、展望
參考文獻
攻讀碩士學位期間取得的研究成果
致謝
答辯委員會對論文的評定意見
本文編號:3763395
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮寫詞表
第一章 緒論
1.1 增生性瘢痕的研究概況
1.2 ITGB4BP 蛋白的研究現(xiàn)狀
1.3 Wnt/β-catenin 信號通路概述
1.4 本課題的研究背景及意義
1.5 本課題的主要研究內容
第二章 真核表達載體pCMV-ITGB4BP 的構建
2.1 前言
2.2 材料與方法
2.2.1 材料
2.2.2 方法
2.3 實驗結果
2.3.1 皮膚組織總RNA 提取結果
2.3.2 RT-PCR 結果
2.3.3 連接產物的轉化
2.3.4 pCMV-ITGB4BP 重組載體PCR 及酶切鑒定
2.3.5 pCMV-ITGB4BP 重組質粒測序鑒定
2.4 討論
第三章 ITGB4BP 對 Wnt/β-catenin 信號通路活性影響的實驗研究
3.1 前言
3.2 材料與方法
3.2.1 材料
3.2.2 方法
3.3 實驗結果
3.3.1 Western blot 檢測ITGB4BP 對細胞內β-catenin 水平的影響
3.3.2 激光共聚焦技術觀察β-catenin 在細胞內的表達
3.3.3 ITGB4BP 對TCF/LEF 轉錄活性的影響
3.4 討論
結論與展望
一、結論
二、展望
參考文獻
攻讀碩士學位期間取得的研究成果
致謝
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