表觀遺傳學(xué)的改變對生物體的基因表達(dá)調(diào)控起重要作用,而生物體衰老的過程中會(huì)伴隨著DNA甲基化與去甲基化修飾等表觀遺傳學(xué)的改變。衰老與甲基化修飾兩者相互作用影響。而間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells,MSCs）雖然在體外培養(yǎng)增殖能力極強(qiáng),但在有限次數(shù)傳代后,MSCs出現(xiàn)增殖抑制等衰老特征,其形態(tài)、生物學(xué)特征以及表觀遺傳特征產(chǎn)生了不同程度的變化。細(xì)胞增殖抑制的出現(xiàn)以及增殖過程表觀遺傳學(xué)的改變這兩個(gè)因素都為MSCs的臨床應(yīng)用增加了難度和不確定因素。因此本文希望通過檢測MSCs在體外增殖過程中細(xì)胞的衰老表現(xiàn)以及DNA甲基化與羥甲基化的變化情況,進(jìn)而了解MSCs衰老過程中DNA表觀遺傳學(xué)的改變,以及衰老對于其DNA甲基化與羥甲基化的影響,為MSCs“永生化”提供表觀遺傳學(xué)的研究基礎(chǔ)。本課題將從人骨髓中分離并提取MSCs進(jìn)行培養(yǎng)傳代。在傳代過程中觀察其衰老表現(xiàn),并通過建立超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）檢測5-甲基脫氧胞苷（5mdC）與5-羥甲基脫氧胞苷（5hmdC）的方法觀察MSCs在體外增殖過程中細(xì)胞的全基因組DNA甲基化與羥甲基化的變化情況,為MSCs衰老... 

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略語表
摘要
ABSTRACT
前言
    1 研究背景
    2 研究內(nèi)容及意義
第一部分 從人骨髓中分離MSCS進(jìn)行傳代培養(yǎng)并評價(jià)其生物學(xué)特性
    1 材料與儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
    5 小結(jié)
第二部分 建立超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)檢測全基因組DNA中5-甲基脫氧胞苷(5MDC)與5-羥甲基脫氧胞苷(5HMDC)水平的方法..
    1 材料與儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
    5 小結(jié)
第三部分 MSCS體外增殖過程中的動(dòng)態(tài)衰老變化以及全基因組DNA甲基化與羥甲基化的變化情況
    1 材料與儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
    5 小結(jié)
全文總結(jié)
展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Oct4過表達(dá)對小鼠胚胎干細(xì)胞穩(wěn)定性的影響[J]. 郁烔峰,夏夢,李冬娜,任立成.  醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐. 2017(21)



本文編號(hào)：3733682