NK細胞是重要的天然免疫細胞,在抗腫瘤、抗感染的免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要的作用。雖然NK細胞行使重要的免疫監(jiān)視功能,但在一些情形下NK細胞的過度活化會導(dǎo)致不必要的組織損傷、甚至危及生命,因而,機體需要通過某種方式維持NK細胞的活性,使之處于可控的范圍內(nèi),從而維持NK細胞對自身的耐受。與T、B細胞的免疫耐受相比較,維持NK細胞對自身耐受的研究較少,目前認為可以通過抑制性受體介導(dǎo)的方式或活化后誘導(dǎo)的細胞凋亡來實現(xiàn),而抑制性受體在NK細胞與輔助細胞之間相互作用的過程中發(fā)揮重要的調(diào)控功能。在富含NK細胞的肝臟中,NK細胞與輔助細胞之間的相互作用是NK細胞介導(dǎo)的天然免疫應(yīng)答的重要環(huán)節(jié),通過研究抑制性受體在NK細胞介導(dǎo)的肝臟天然免疫應(yīng)答中的調(diào)控作用及對后者造成的病理變化的影響,將有助于了解NK細胞維持自身耐受的機制。 主要獲得的結(jié)果有以下兩部分： 1.抑制性受體TIGIT通過負調(diào)NK細胞和枯否細胞相互作用在急性病毒性肝炎中對小鼠起保護作用 我們發(fā)現(xiàn)病毒雙鏈RNA類似物poly I:C聯(lián)合肝臟致敏齊D-GalN的注射、或嗜肝病毒腺病毒的急性感染,會導(dǎo)致TIGIT選擇性地在NK細胞上... 

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
表序
圖序
符號說明
第一章 綜述：NK細胞在肝臟天然免疫應(yīng)答過程中維持自身耐受的機制
    1.1 NK細胞是重要的天然免疫細胞
    1.2 NK細胞與自身免疫性疾病
    1.3 NK細胞維持自身耐受的機制
        1.3.1 免疫耐受及其意義
        1.3.2 誘導(dǎo)免疫耐受的方式
        1.3.3 決定免疫耐受的影響因素
        1.3.4 形成免疫耐受的機制
        1.3.5 NK細胞對自身的耐受
    1.4 NK細胞與輔助細胞的相互作用
        1.4.0 T細胞與輔助細胞的相互作用
        1.4.1 NK細胞與輔助細胞的相互作用
    1.5 共抑制分子TIGIT的結(jié)構(gòu)與功能
        1.5.1 TIGIT的結(jié)構(gòu)
        1.5.2 TIGIT在T細胞上的功能
        1.5.3 TIGIT在NK細胞上的功能
    1.6 肝臟是天然免疫優(yōu)勢器官
第二章 引言
    2.1 TIGIT在POLY Ⅰ：C/D-GALN誘導(dǎo)肝損傷及在腺病毒急性感染過程中的表達變化
    2.2 TIGIT在肝臟再生過程中的表達變化
    2.3 TIGIT在POLY Ⅰ：C/D-GALN誘導(dǎo)肝損傷及在腺病毒急性感染過程中的作用
    2.4 TIGIT在肝臟再生過程中的作用
    2.5 PVR在POLY Ⅰ：C/D-GALN誘導(dǎo)肝損傷及在腺病毒急性感染過程中的作用
    2.6 PVR在肝臟再生中的作用
    2.7 TIGIT與配體相互作用在NK細胞與巨噬細胞共培養(yǎng)中的作用
    2.8 TIGIT與IFN-Γ之間的關(guān)系
第三章 實驗材料與方法
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 試劑配制
        3.1.3 實驗儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 poly Ⅰ：C/D-GalN誘導(dǎo)肝損傷模型
        3.2.2 腺病毒急性感染模型
        3.2.3 70%肝切除
        3.2.4 細胞的分離與純化
        3.2.5 組織病理分析
        3.2.6 免疫組織化學(xué)染色
        3.2.7 單克隆抗體純化
        3.2.8 細胞清除
        3.2.9 血清轉(zhuǎn)氨酶水平的檢測
        3.2.10 細胞過繼轉(zhuǎn)輸
        3.2.11 PVR基因的敲低
        3.2.12 殺傷實驗
        3.2.13 細胞共培養(yǎng)實驗
        3.2.14 IFN-γ的ELISA檢測
        3.2.15 抗小鼠TIGIT阻斷抗體的制備
        3.2.16 NK細胞-枯否細胞結(jié)合實驗
        3.2.17 枯否細胞遷移實驗
        3.2.18 過表達載體的構(gòu)建
        3.2.19 干擾載體的構(gòu)建
        3.2.20 復(fù)制缺陷型腺病毒的制備
        3.2.21 細胞計數(shù)
        3.2.22 流式細胞術(shù)細胞表面分子標記
        3.2.23 流式細胞術(shù)胞內(nèi)因子標記
        3.2.24 統(tǒng)計學(xué)分析
第四章 實驗結(jié)果
    4.1 TIGIT通過負調(diào)NK細胞和枯否細胞相互作用在急性病毒性肝炎中對小鼠起保護作用
        4.1.1 TIGIT不影響NK細胞成熟標志的表達
        4.1.2 poly Ⅰ：C/D-GalN聯(lián)合誘導(dǎo)小鼠肝臟NK細胞上調(diào)表達TIGIT
        4.1.3 TIGIT對poly Ⅰ：C/D-GalN聯(lián)合誘導(dǎo)的小鼠肝臟損傷具有保護作用
        4.1.4 TIGIT在poly Ⅰ：C/D-GalN聯(lián)合誘導(dǎo)的小鼠急性肝炎中抑制NK細胞的活化
        4.1.5 NK細胞表達的TIGIT對poly Ⅰ：C/D-GalN聯(lián)合誘導(dǎo)的小鼠肝損傷具有保護作用
        4.1.6 TIGIT可能不影響TIGIT非依賴的NK細胞功能
        4.1.7 在poly Ⅰ：C/D-GalN聯(lián)合誘導(dǎo)的小鼠肝炎中,TIGIT在NK細胞與肝細胞的識別中的作用不明顯
        4.1.8 枯否細胞表達的PVR分子對poly Ⅰ：C/D-GalN聯(lián)合誘導(dǎo)的小鼠肝損傷具有保護作用
        4.1.9 枯否細胞表達的PVR分子對枯否細胞本身產(chǎn)生細胞因子、遷移以及和NK細胞相互結(jié)合沒有明顯的影響
        4.1.10 TIGIT-PVR負調(diào)控NK細胞與枯否細胞的相互作用
        4.1.11 TIGIT-CD112對NK細胞與枯否細胞相互作用的調(diào)控效應(yīng)不明顯
        4.1.12 TIGIT在腺病毒急性感染誘導(dǎo)的肝損傷中對小鼠起保護作用
        4.1.13 TIGIT在poly Ⅰ：C/D-GalN聯(lián)合誘導(dǎo)的小鼠肝損傷中的保護作用依賴IFN-γ的存在
    4.2 TIGIT通過負調(diào)NK細胞與肝細胞相互作用對肝臟再生進行保護
        4.2.1 肝臟再生過程中NK細胞上調(diào)表達TIGIT
        4.2.2 TIGIT對肝臟再生具有保護作用
        4.2.3 TIGIT在肝臟再生過程中抑制NK細胞活化
        4.2.4 TIGIT對肝臟再生的保護作用依賴NK細胞的存在
        4.2.5 TIGIT對肝臟再生的保護作用依賴于肝臟再生過程中肝細胞上調(diào)表達的PVR
        4.2.6 TIGIT負調(diào)NK細胞與肝細胞相互作用時產(chǎn)生的IFN-γ
        4.2.7 TIGIT對肝臟再生的保護作用依賴于IFN-γ的存在
第五章 討論
    5.1 活化性受體CD226和CD96與抑制性受體TIGIT之間的競爭關(guān)系
    5.2 TIGIT配體PVR的抑制性功能
    5.3 TIGIT的調(diào)控效應(yīng)在NK細胞面對不同靶細胞時的差異性
    5.4 NK細胞對肝細胞增大的調(diào)控
    5.5 TIGIT-PVR相互作用的潛在臨床意義
參考文獻
致謝
攻讀博士學(xué)位期間的主要研究成果
    論文發(fā)表情況及專利成果
    會議論文



本文編號：3730224