JNK/SAPK、P38信號轉(zhuǎn)導通路在高滲透壓介導髓核細胞凋亡中的作用
發(fā)布時間:2022-12-04 00:07
目的觀察高滲透壓對兔髓核細胞活性的影響及JNK/SAPK、P38信號轉(zhuǎn)導通路在此過程中的作用。 方法不同滲透壓及時間段處理髓核細胞后采用MTT實驗檢測細胞活性并運用流式細胞儀檢測髓核細胞凋亡情況,同時利用免疫熒光和Western blot技術(shù)檢測磷酸化P38絲裂原活化蛋白激酶(Phospho-P38mitogen-activated protein kinases, P-P38MAPK)、磷酸化JNK/SAPK激酶(Phospho-c-Jun N-terminal kinases/Stress-activated protein kinases, P-JNK/SAPK)的亞細胞定位及表達水平,觀察其對髓核細胞凋亡的影響。 結(jié)果高滲透壓(600m0sm)可導致髓核細胞顯著凋亡及P-P38MAPK. P-JNK/SAPK蛋白表達水平改變。600m0sm各實驗組凋亡細胞均與對照組有明顯統(tǒng)計學意義(P<0.01),相應阻斷組凋亡細胞明顯減少,400m0sm各實驗組和阻斷組凋亡細胞與對照組相比均無明顯差異;免疫熒光結(jié)果顯示P-P38MAPK、P-JNK/SAPK在髓核細胞質(zhì)和細胞核中均有...
【文章頁數(shù)】:37 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第1章 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實驗動物
1.1.2 實驗試劑
1.1.3 實驗儀器
1.2 實驗方法
1.2.1 兔髓核細胞的分離和培養(yǎng)
1.2.2 調(diào)整培養(yǎng)液滲透壓
1.2.3 實驗分組
1.2.4 實驗阻斷模型的建立
1.2.5 細胞活性檢測
1.2.6 流式細胞儀檢測細胞凋亡
1.2.7 免疫熒光雙標記
1.2.8 Western Blot
1.3 統(tǒng)計學處理
第2章 實驗結(jié)果
2.1 髓核細胞培養(yǎng)
2.2 MTT檢測髓核細胞活力
2.3 AnnexinV/PI染色流式細胞儀檢測兔髓核細胞凋亡率
2.4 P-P38MAPK、P-JNK/SAPK在髓核細胞內(nèi)的定位及表達
2.5 高滲透壓刺激P-P38MAPK、P-JNK/SAPK蛋白表達變化
第三章 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
文獻綜述參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
附錄
致謝
本文編號:3707240
【文章頁數(shù)】:37 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第1章 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實驗動物
1.1.2 實驗試劑
1.1.3 實驗儀器
1.2 實驗方法
1.2.1 兔髓核細胞的分離和培養(yǎng)
1.2.2 調(diào)整培養(yǎng)液滲透壓
1.2.3 實驗分組
1.2.4 實驗阻斷模型的建立
1.2.5 細胞活性檢測
1.2.6 流式細胞儀檢測細胞凋亡
1.2.7 免疫熒光雙標記
1.2.8 Western Blot
1.3 統(tǒng)計學處理
第2章 實驗結(jié)果
2.1 髓核細胞培養(yǎng)
2.2 MTT檢測髓核細胞活力
2.3 AnnexinV/PI染色流式細胞儀檢測兔髓核細胞凋亡率
2.4 P-P38MAPK、P-JNK/SAPK在髓核細胞內(nèi)的定位及表達
2.5 高滲透壓刺激P-P38MAPK、P-JNK/SAPK蛋白表達變化
第三章 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
文獻綜述參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
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