JNK/SAPK、P38信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在高滲透壓介導(dǎo)髓核細(xì)胞凋亡中的作用
發(fā)布時(shí)間:2022-12-04 00:07
目的觀察高滲透壓對(duì)兔髓核細(xì)胞活性的影響及JNK/SAPK、P38信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在此過程中的作用。 方法不同滲透壓及時(shí)間段處理髓核細(xì)胞后采用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞活性并運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)髓核細(xì)胞凋亡情況,同時(shí)利用免疫熒光和Western blot技術(shù)檢測(cè)磷酸化P38絲裂原活化蛋白激酶(Phospho-P38mitogen-activated protein kinases, P-P38MAPK)、磷酸化JNK/SAPK激酶(Phospho-c-Jun N-terminal kinases/Stress-activated protein kinases, P-JNK/SAPK)的亞細(xì)胞定位及表達(dá)水平,觀察其對(duì)髓核細(xì)胞凋亡的影響。 結(jié)果高滲透壓(600m0sm)可導(dǎo)致髓核細(xì)胞顯著凋亡及P-P38MAPK. P-JNK/SAPK蛋白表達(dá)水平改變。600m0sm各實(shí)驗(yàn)組凋亡細(xì)胞均與對(duì)照組有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),相應(yīng)阻斷組凋亡細(xì)胞明顯減少,400m0sm各實(shí)驗(yàn)組和阻斷組凋亡細(xì)胞與對(duì)照組相比均無明顯差異;免疫熒光結(jié)果顯示P-P38MAPK、P-JNK/SAPK在髓核細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中均有...
【文章頁數(shù)】:37 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第1章 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 兔髓核細(xì)胞的分離和培養(yǎng)
1.2.2 調(diào)整培養(yǎng)液滲透壓
1.2.3 實(shí)驗(yàn)分組
1.2.4 實(shí)驗(yàn)阻斷模型的建立
1.2.5 細(xì)胞活性檢測(cè)
1.2.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡
1.2.7 免疫熒光雙標(biāo)記
1.2.8 Western Blot
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第2章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1 髓核細(xì)胞培養(yǎng)
2.2 MTT檢測(cè)髓核細(xì)胞活力
2.3 AnnexinV/PI染色流式細(xì)胞儀檢測(cè)兔髓核細(xì)胞凋亡率
2.4 P-P38MAPK、P-JNK/SAPK在髓核細(xì)胞內(nèi)的定位及表達(dá)
2.5 高滲透壓刺激P-P38MAPK、P-JNK/SAPK蛋白表達(dá)變化
第三章 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
文獻(xiàn)綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄
致謝
本文編號(hào):3707240
【文章頁數(shù)】:37 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第1章 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 兔髓核細(xì)胞的分離和培養(yǎng)
1.2.2 調(diào)整培養(yǎng)液滲透壓
1.2.3 實(shí)驗(yàn)分組
1.2.4 實(shí)驗(yàn)阻斷模型的建立
1.2.5 細(xì)胞活性檢測(cè)
1.2.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡
1.2.7 免疫熒光雙標(biāo)記
1.2.8 Western Blot
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第2章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1 髓核細(xì)胞培養(yǎng)
2.2 MTT檢測(cè)髓核細(xì)胞活力
2.3 AnnexinV/PI染色流式細(xì)胞儀檢測(cè)兔髓核細(xì)胞凋亡率
2.4 P-P38MAPK、P-JNK/SAPK在髓核細(xì)胞內(nèi)的定位及表達(dá)
2.5 高滲透壓刺激P-P38MAPK、P-JNK/SAPK蛋白表達(dá)變化
第三章 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
文獻(xiàn)綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄
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本文編號(hào):3707240
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