背景作為體液免疫的一部分,B細胞在機體適應(yīng)性免疫調(diào)節(jié)中具有重要作用,機體產(chǎn)生的抗體（Antibody,Ab）在感染性疾病、腫瘤、自身免疫病和移植排斥中扮演重要角色�？贵w是由B細胞分化、發(fā)育而來的漿細胞所分泌的。B細胞的分化發(fā)育和活化過程受許多信號通路的調(diào)節(jié),例如 PI3K（Phosphoinositide 3-kiase）信號通路,NF-κB（（Nuclearfactor of kappa B）信號通路,BCR（B-cell receptor）信號通路和Notch信號通路,其中Notch信號通路在B細胞中的功能是當前的研究熱點之一。早在1917年,遺傳學(xué)家Thomas Hunt Morgan和他的同事在具有殘缺翅膀表型的果蠅中首次描述了 Notch基因,Notch受體是一類高度保守的跨膜蛋白,在結(jié)構(gòu)上分為胞外區(qū)（NEC）,跨膜區(qū)（NTM）和胞內(nèi)域（NICD）,哺乳類動物Notch受體家族有四個成員,分別為Notch1-4,可與五個配體相結(jié)合（Delta-like1,3,4和Jagged1,2）,Notch信號通路的激活起始于鄰近細胞表面的配體-受體相互作用,進而影響目的基因的轉(zhuǎn)錄。目前... 

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
1 材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 實驗用動物
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 引物設(shè)計
        1.1.4 常用試劑的配制
    1.2 方法
        1.2.1 小鼠的繁殖
        1.2.2 小鼠基因型鑒定
        1.2.3 蛋白質(zhì)免疫印跡實驗(Western blotting)
        1.2.4 從細胞中提取總RNA
        1.2.5 將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA
        1.2.6 Real-time Q-PCR
        1.2.7 流式細胞術(shù)實驗
        1.2.8 酶聯(lián)免疫吸附實驗
2 實驗結(jié)果
    2.1 Notch1在LPS刺激的CD19~(hi)B細胞上高表達
    2.2 用CD19cre體系會使LPS刺激活化的B細胞上Notch1表達下降
    2.3 B細胞特異性敲除Notch1后,用LPS刺激B細胞活化,抗體的產(chǎn)生減少
    2.4 B細胞上Notch1敲除后,全脾細胞用LPS刺激培養(yǎng)后抗體的產(chǎn)生不受影響
    2.5 B細胞上Notch1敲除后不影響實驗性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓膜炎(EAE)小鼠抗體的產(chǎn)生
    2.6 將Notch1蛋白與特異性敲除Notch1的B細胞共培養(yǎng),用LPS刺激培養(yǎng),可促進抗體的產(chǎn)生
3 討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
在讀期間參加學(xué)術(shù)活動及研究成果



本文編號：3706464