目的： 本研究探討kisspeptin/GPR54在大鼠卵巢內(nèi)的表達(dá)變化,以及通過離體細(xì)胞培養(yǎng),觀察kisspeptin/GPR54對(duì)大鼠卵巢黃體細(xì)胞內(nèi)分泌功能的影響及其機(jī)理。 方法： 1、通過免疫組織化學(xué)、實(shí)時(shí)定量PCR和免疫印跡技術(shù)觀察卵巢組織中kisspeptin和GPR54表達(dá)水平及表達(dá)部位的變化。 2、運(yùn)用離體細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和放射免疫方法觀察kisspeptin對(duì)基礎(chǔ)和hCG誘導(dǎo)的大鼠卵巢黃體細(xì)胞內(nèi)分泌功能的影響。 3、采用免疫印跡技術(shù)觀察kisspeptin對(duì)基礎(chǔ)和hCG誘導(dǎo)大鼠黃體細(xì)胞孕酮分泌可能激活的信號(hào)通路。 結(jié)果： 1、實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果表明：未成年大鼠的卵巢組織經(jīng)促性腺激素處理后,KiSS-1mRNA表達(dá)水平明顯增加（P＜0.01）,經(jīng)hCG處理后7天,其表達(dá)水平達(dá)到高峰。 2、免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示：在未成年大鼠,KiSS-1和GPR54蛋白在初級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞中呈現(xiàn)弱陽性的表達(dá)。經(jīng)促性腺激素處理后,KiSS-1蛋白主要表達(dá)于卵泡的膜細(xì)胞、間質(zhì)以及黃體,GPR54蛋白也明顯表達(dá)于黃體。 3、在離體培養(yǎng)的黃體細(xì)胞,... 

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 溶液配制
    2.2 方法
        2.2.1 黃體細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 激素測量
        2.2.3 免疫組織化學(xué)
        2.2.4 總RNA的制備和實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        2.2.5 蛋白印跡(Western blotting)實(shí)驗(yàn)步驟
        2.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第3章 結(jié)果
    3.1 促性腺激素處理后大鼠卵巢KiSS-1 mRNA和蛋白的表達(dá)水平及表達(dá)部位的變化
    3.2 GPR54蛋白在大鼠卵巢組織中定位及表達(dá)水平的變化
    3.3 Kisspeptin-10對(duì)基礎(chǔ)和hCG誘導(dǎo)的大鼠黃體細(xì)胞分泌孕激素和雌二醇的影響
    3.4 Kisspeptin-10對(duì)黃體細(xì)胞合成類固醇激素相關(guān)蛋白的調(diào)節(jié)作用
    3.5 Kisspeptin-10對(duì)hCG誘導(dǎo)大鼠黃體細(xì)胞分泌孕酮的作用可能激活的信號(hào)通路的影響
    3.6 ERK1/2和Akt抑制劑對(duì)kisspeptin-10作用的大鼠黃體細(xì)胞孕酮分泌的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3679657