目的： 本研究探討kisspeptin/GPR54在大鼠卵巢內(nèi)的表達變化,以及通過離體細胞培養(yǎng),觀察kisspeptin/GPR54對大鼠卵巢黃體細胞內(nèi)分泌功能的影響及其機理。 方法： 1、通過免疫組織化學、實時定量PCR和免疫印跡技術(shù)觀察卵巢組織中kisspeptin和GPR54表達水平及表達部位的變化。 2、運用離體細胞培養(yǎng)技術(shù)和放射免疫方法觀察kisspeptin對基礎(chǔ)和hCG誘導的大鼠卵巢黃體細胞內(nèi)分泌功能的影響。 3、采用免疫印跡技術(shù)觀察kisspeptin對基礎(chǔ)和hCG誘導大鼠黃體細胞孕酮分泌可能激活的信號通路。 結(jié)果： 1、實時定量PCR結(jié)果表明：未成年大鼠的卵巢組織經(jīng)促性腺激素處理后,KiSS-1mRNA表達水平明顯增加（P＜0.01）,經(jīng)hCG處理后7天,其表達水平達到高峰。 2、免疫組織化學結(jié)果顯示：在未成年大鼠,KiSS-1和GPR54蛋白在初級卵泡的顆粒細胞中呈現(xiàn)弱陽性的表達。經(jīng)促性腺激素處理后,KiSS-1蛋白主要表達于卵泡的膜細胞、間質(zhì)以及黃體,GPR54蛋白也明顯表達于黃體。 3、在離體培養(yǎng)的黃體細胞,... 

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 溶液配制
    2.2 方法
        2.2.1 黃體細胞培養(yǎng)
        2.2.2 激素測量
        2.2.3 免疫組織化學
        2.2.4 總RNA的制備和實時熒光定量PCR
        2.2.5 蛋白印跡(Western blotting)實驗步驟
        2.2.6 統(tǒng)計學處理
第3章 結(jié)果
    3.1 促性腺激素處理后大鼠卵巢KiSS-1 mRNA和蛋白的表達水平及表達部位的變化
    3.2 GPR54蛋白在大鼠卵巢組織中定位及表達水平的變化
    3.3 Kisspeptin-10對基礎(chǔ)和hCG誘導的大鼠黃體細胞分泌孕激素和雌二醇的影響
    3.4 Kisspeptin-10對黃體細胞合成類固醇激素相關(guān)蛋白的調(diào)節(jié)作用
    3.5 Kisspeptin-10對hCG誘導大鼠黃體細胞分泌孕酮的作用可能激活的信號通路的影響
    3.6 ERK1/2和Akt抑制劑對kisspeptin-10作用的大鼠黃體細胞孕酮分泌的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
綜述
    參考文獻



本文編號：3679657