目的制備甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1（TTF-1）單克隆抗體,為臨床工作及后續(xù)研究奠定基礎(chǔ)。方法以聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增目的基因,并構(gòu)建TTF-1/p ET32a重組質(zhì)粒,誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白,經(jīng)鎳瓊脂糖親和層析柱洗脫目的蛋白,并將洗脫液經(jīng)十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測蛋白純度,經(jīng)過免疫學(xué)評(píng)價(jià)合格后,進(jìn)行小鼠體內(nèi)免疫,效價(jià)評(píng)價(jià)后通過細(xì)胞融合篩選陽性細(xì)胞株,制備分泌TTF-1單克隆抗體,并對(duì)得到的抗體進(jìn)行免疫組化驗(yàn)證。結(jié)果獲得能穩(wěn)定分泌TTF-1單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,且其產(chǎn)生的抗體與TTF-1抗原具有良好的免疫學(xué)反應(yīng)。結(jié)論成功制備出TTF-1單克隆抗體,為進(jìn)一步提高相關(guān)腫瘤的診斷率提供了新的試劑。 

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與細(xì)胞株
        1.1.2 主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 TTF-1載體構(gòu)建
        1.2.2 誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白
        1.2.3 目的蛋白表達(dá)純化
        1.2.4 TTF-1重組蛋白的免疫學(xué)評(píng)價(jià)
        1.2.5 雜交瘤細(xì)胞株的構(gòu)建
        1.2.6 單克隆抗體的鑒定
2 結(jié)果
    2.1 重組表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定
        2.1.1 重組表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.1.2 重組質(zhì)粒的鑒定
    2.2 重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)和純化
    2.3 融合蛋白的鑒定
    2.4 小鼠免疫評(píng)價(jià)結(jié)果
    2.5 雜交瘤細(xì)胞株的篩選
    2.6 抗體鑒定
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不同化療方案治療晚期非小細(xì)胞肺癌臨床觀察[J]. 曾育,譚晏林,黎昌龍,李輝林.  腫瘤基礎(chǔ)與臨床. 2018(03)
[2]血清TTF-1、MIP-1α水平與甲狀腺乳頭狀微小癌的關(guān)系研究[J]. 楊雪,孫曉菲,范慧潔,崔國敏,于江紅,董其娟,王慧君.  實(shí)用癌癥雜志. 2018(05)
[3]乳頭狀甲狀腺癌CT誤診分析[J]. 許凡勇,張黎,夏進(jìn)東.  實(shí)用放射學(xué)雜志. 2018 (03)
[4]非小細(xì)胞肺癌組織EGFR、TTF-1、CK7表達(dá)及其意義[J]. 吳琳,張?zhí)K寧.  山東醫(yī)藥. 2017(20)
[5]TTF-1和galectin-3在鞍區(qū)病變中的表達(dá)[J]. 霍真,周良銳,羅玉鳳,梁智勇.  診斷病理學(xué)雜志. 2017(03)
[6]卵巢及子宮透明細(xì)胞癌、子宮內(nèi)膜樣癌中NapsinA、TTF-1、PAX8及CA125的表達(dá)及意義[J]. 錢萍,高寶蓮.  臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2017(02)
[7]甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用觀察[J]. 謝樹瑞,謝艷芳,葉翠群.  深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2015(13)
[8]甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1免疫組織化學(xué)檢測在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J]. 何德明,侯英勇.  中華病理學(xué)雜志. 2013 (08)
[9]細(xì)胞角蛋白19、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1與甲狀腺癌的關(guān)系探討[J]. 胡瑛君,李銘,蔡偉耀,孟浩.  健康教育與健康促進(jìn). 2013(02)
[10]甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1在肺癌中的表達(dá)及應(yīng)用[J]. 林冬梅,鄒霜梅,呂寧,溫芃,劉秀云,何祖根.  中華腫瘤雜志. 2004(10)



本文編號(hào)：3673743