研究背景:胃癌（gastric cancer）是消化道常見惡性腫瘤,是發(fā)生率世界排名第五位的癌癥,其死亡率高達(dá)75%,因此探索胃癌的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制有非常重要的意義。胃癌的發(fā)生發(fā)展與幽門螺桿菌（Helicobacter pylori,H.pylori）感染密切相關(guān),其致病機(jī)制也是現(xiàn)在的研究熱點(diǎn)。TNF-α誘導(dǎo)蛋白（TNF-α-inducing protein,Tipα）是H.pylori特異性的分泌蛋白,被認(rèn)為是胃癌發(fā)展相關(guān)的新的致癌因子。新近研究表明,Tipα能夠通過誘導(dǎo)胃黏膜上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-to-mesenchymal transition,EMT）等參與H.pylori致病過程,但其誘導(dǎo)EMT形成的機(jī)制仍不清楚,它所涉及的細(xì)胞通路也有待進(jìn)一步研究。因此研究Tipα對(duì)胃癌細(xì)胞EMT形成的影響及其相關(guān)作用機(jī)制,可能為胃癌的臨床診斷及靶向治療提供新的靶點(diǎn)。研究目的:通過H.pylori Tipα處理胃癌細(xì)胞系SGC7901細(xì)胞,研究Tipα對(duì)胃癌細(xì)胞增殖、凋亡、遷移和侵襲等生物學(xué)功能影響,探究TGF-β1/Smad信號(hào)通路在其中的作用。研究方法:（... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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摘要
Abstract
常用英文縮寫
第1章 緒論
第2章 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
    2.2 重組菌、細(xì)胞株
    2.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    2.4 引物設(shè)計(jì)
第3章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 Tipα重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)
    3.2 Tipα重組蛋白的純化及鑒定
    3.3 純化蛋白去內(nèi)毒素
    3.4 胃癌細(xì)胞系GC7901細(xì)胞復(fù)蘇、換液、傳代及凍存
    3.5 Tipα刺激處理SGC7901細(xì)胞
    3.6 實(shí)驗(yàn)分組與處理
    3.7 CCK法檢測(cè)細(xì)胞增殖
    3.8 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
    3.9 ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液上清液中TGF-β1水平
    3.10 qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)E-cadherin、α-SMA、MMP9、TGF-β1的mRNA表達(dá)
    3.11 Western-blot檢測(cè)E-cadherin、α-SMA、MMP9、TGF-β1、Smad3、p-Smad3蛋白的表達(dá)
    3.12 劃痕愈合試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力
    3.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 Tipα重組蛋白的表達(dá)、純化及鑒定
    4.2 Tipα刺激對(duì)SGC7901細(xì)胞形態(tài)學(xué)、增殖和凋亡的影響
    4.3 TGF-β1/Smad信號(hào)通路參與Tipα誘導(dǎo)SGC7901細(xì)胞EMT的形成
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
課題資助
作者攻讀學(xué)位期間的科研成果
致謝



本文編號(hào)：3646960