目的建立慢性粒細(xì)胞白血�。–ML）的轉(zhuǎn)基因嵌合小鼠模型,為靶向白血病干細(xì)胞（LSCs）治療CML的研究提供良好的動(dòng)物模型。方法將Bcr-abl轉(zhuǎn)基因小鼠與SCL-t TA轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行雜交,子代小鼠再與GFP轉(zhuǎn)基因小鼠雜交,PCR鑒定Bcr-abl、t TA和GFP基因三陽性的小鼠（GFP/SCL-t TA/Bcr-abl小鼠）。通過誘導(dǎo)GFP/SCL-t TA/Bcr-abl小鼠Bcr-abl基因表達(dá)4周后,取其骨髓白細(xì)胞移植至經(jīng)致死劑量（900 c Gy）輻照的FVB/N野生型小鼠。移植3周后,采用Western blotting檢測Bcr-abl蛋白表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠外周血GFP+中性粒細(xì)胞的比例以及脾臟和骨髓GFP+LSCs的比例。結(jié)果 PCR結(jié)果顯示,GFP/SCL-t TA/Bcr-abl小鼠骨髓細(xì)胞成功植入FVB/N受體小鼠;Western blotting檢測結(jié)果顯示,移植小鼠的骨髓細(xì)胞中表達(dá)Bcr-abl蛋白;流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示,移植小鼠的外周血GFP+中性粒細(xì)胞比例以及脾臟和骨髓GFP+LSCs的比例明顯升高。結(jié)論成功建立了GFP/SCL-t TA/Bcr-a... 

【文章來源】：廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào). 2016,32(04)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.2 主要儀器
        1.1.3 主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 子代小鼠的正常繁殖培養(yǎng)
        1.2.2 子代小鼠的雜交繁殖培養(yǎng)
        1.2.3 PCR檢測小鼠GFP、SCL-t TA和Bcr-abl基因
        1.2.4 小鼠骨髓移植
        1.2.5 Western blotting檢測Bcr-abl融合蛋白
        1.2.6 嵌合小鼠腿骨及脾臟組織形態(tài)學(xué)檢查
        1.2.7流式細(xì)胞儀檢測嵌合小鼠GFP+中性粒細(xì)胞和GFP+LSCs比例
        1.2.8 統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果
    2.1 PCR鑒定GFP/SCL-t TA/Bcr-abl嵌合小鼠
    2.2 Western blotting檢測嵌合小鼠Bcr-abl蛋白的表達(dá)
    2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測嵌合小鼠GFP+中性粒細(xì)胞和GFP+LSCSs比例
    2.4 嵌合小鼠腿骨及脾臟組織形態(tài)結(jié)構(gòu)分析
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]KCL22/NOD-SCID小鼠慢性粒細(xì)胞白血病移植瘤模型的建立及其鑒定[J]. 文良雪,劉鑫,李會(huì),黃寧姝,黃崢蘭,馮文莉.  中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2015(02)
[2]類人慢性粒細(xì)胞性白血病小鼠模型的建立[J]. 潘勤,金紅,李婧,姜支農(nóng),姚云斌,胡金飛,李達(dá),金梅,潘宏銘.  中國病理生理雜志. 2013(08)
[3]小劑量K562細(xì)胞NOD/SCID小鼠動(dòng)物模型的建立[J]. 黎陽,張緒超,黃紹良,魏菁,黃文革,周敦華,吳燕峰.  中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2005(05)

碩士論文
[1]采用逆轉(zhuǎn)錄病毒技術(shù)建立人慢性粒細(xì)胞性白血病小鼠模型[D]. 李婧.浙江大學(xué) 2011
[2]bcr/abl逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的小鼠慢性粒細(xì)胞白血病樣模型的建立[D]. 張文萍.重慶醫(yī)科大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3626143