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銅綠假單胞菌調(diào)節(jié)蛋白VqsR、Arr及T3SS系統(tǒng)轉(zhuǎn)運蛋白PopB/D的結(jié)構(gòu)與功能研究

發(fā)布時間:2022-01-22 06:48
  銅綠假單胞菌是一種十分常見的條件性致病菌,當身體存在傷口或者免疫力比較低的時候,它才會感染和致病,而且非常難以除去,產(chǎn)生慢性感染最終可能導致死亡。因為它容易感染傷口,因此是醫(yī)院手術(shù)和一些治療后感染的一個主要來源,并常存在于患有囊性纖維化個體中引起肺部感染。群體效應是細胞間的一種交流,可以使細菌根據(jù)細胞的濃度來調(diào)節(jié)基因的表達。群體效應途徑中包含大量的調(diào)節(jié)子,這些調(diào)節(jié)子可以控制很多毒性因子的表達,使得病原體能夠適應各種環(huán)境,抵抗各種治療方式。在銅綠假單胞菌中有l(wèi)as和rhl兩個主要的群體效應系統(tǒng),并且las系統(tǒng)會正向調(diào)節(jié)rhl系統(tǒng),形成層級的調(diào)控網(wǎng)絡。細菌雖然是一個個結(jié)構(gòu)比較簡單的個體,但通常它們不會單獨生存,大部分的都是聚集在一起相互影響共同生存,其中一種常見的存在方式就是生物膜。形成生物膜后,菌落對抗生素等藥物的抵抗能力會明顯的增強。環(huán)二鳥苷酸(C-di-GMP)是各種調(diào)控的一個第二信使小分子,在細菌中存在廣泛,其中一個方面就是可以調(diào)節(jié)生物膜的形成。主要由鳥苷酸環(huán)化酶(DGC)和磷酸二酯酶(PDE)催化它的合成和分解,其中EAL domain是分解C-di-GMP的一種PDE酶,可以將... 

【文章來源】:山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:98 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
符號說明
第1章 前言
    1.1 銅綠假單胞菌
        1.1.1 銅綠假單胞菌的介紹
        1.1.2 群體效應
        1.1.3 生物膜
    1.2 第二信使C-di-GMP
    1.3 T3SS分泌系統(tǒng)
    1.4 課題研究主要內(nèi)容
第2章 蛋白質(zhì)VqsR的結(jié)構(gòu)與功能研究
    2.1 蛋白質(zhì)VqsR
    2.2 實驗材料
        2.2.1 菌種和質(zhì)粒載體
        2.2.2 常用工具酶和試劑
        2.2.3 配制試劑
        2.2.4 實驗儀器設(shè)備
    2.3 實驗方法
        2.3.1 蛋白質(zhì)VqsR的相關(guān)克隆
        2.3.2 蛋白質(zhì)表達純化
        2.3.3 蛋白質(zhì)的結(jié)晶和優(yōu)化
        2.3.4 蛋白質(zhì)晶體的衍射和數(shù)據(jù)收集
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 VqsR全長的實驗結(jié)果
        2.4.2 VqsR1-193的實驗結(jié)果
        2.4.3 VqsR的其他實驗結(jié)果
    2.5 本章小結(jié)
第3章 膜蛋白Arr的結(jié)構(gòu)與功能研究
    3.1 膜蛋白Arr
    3.2 實驗方法
        3.2.1 膜蛋白Arr的相關(guān)克隆
        3.2.2 膜蛋白Arr的表達純化
        3.2.3 膜蛋白Arr和EAL domain的結(jié)晶
        3.2.4 膜蛋白Arr和EAL domain的酶活實驗
        3.2.5 膜蛋白Arr和EAL domain的其他實驗
    3.3. 實驗結(jié)果
        3.3.1 膜蛋白Arr全長的實驗結(jié)果
        3.3.2 EAL domain的實驗結(jié)果
        3.3.3 膜蛋白Arr周質(zhì)空間結(jié)構(gòu)域?qū)嶒灲Y(jié)果
        3.3.4 膜蛋白Arr的其他實驗結(jié)果
    3.4 本章小結(jié)
第4章 膜蛋白PopB/D的結(jié)構(gòu)與功能研究
    4.1 膜蛋白PopB和PopD
    4.2 實驗方法
    4.3 實驗結(jié)果
        4.3.1 膜蛋白PopD的實驗結(jié)果
        4.3.2 膜蛋白PopB的實驗結(jié)果
    4.4 本章小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻
致謝
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本文編號:3601734

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