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小鼠胰腺石蠟切片制作程序優(yōu)化與免疫熒光染色探索

發(fā)布時間:2022-01-17 08:58
  目的優(yōu)化小鼠胰腺石蠟切片的制作程序并分析1型糖尿病小鼠胰腺免疫熒光染色結(jié)果。方法多次小劑量鏈脲佐菌素誘導(dǎo)小鼠1型糖尿病,取胰腺,觀察采用不同試劑和處理時間的石蠟包埋程序?qū)σ认偾衅|(zhì)量的影響,并探討胰腺石蠟切片免疫熒光染色的可能假陽性。結(jié)果 95%乙醇15min×2次、100%乙醇Ⅰ6min、100%乙醇Ⅱ7min、苯Ⅰ15min、苯Ⅱ18min、浸蠟90min時制作的小鼠胰腺石蠟切片質(zhì)量最優(yōu)。以小鼠抗高血糖素抗體(一抗)及FITC-山羊抗小鼠二抗免疫染色1型糖尿病小鼠胰腺時常常出現(xiàn)假陽性熒光。結(jié)論脫水、透明、浸蠟等制作程序?qū)π∈笠认偈炃衅|(zhì)量影響較大;苯是優(yōu)于氯仿與二甲苯的胰腺透明劑;1型糖尿病小鼠胰腺不適合以小鼠源抗體為一抗進(jìn)行間接免疫熒光染色。 

【文章來源】:中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2019,28(04)CSCD

【文章頁數(shù)】:4 頁

【部分圖文】:

小鼠胰腺石蠟切片制作程序優(yōu)化與免疫熒光染色探索


1型糖尿病小鼠胰腺高血糖素免疫熒光染色。A,石蠟包埋時以氯仿透明,致使胰腺組織內(nèi)出現(xiàn)許多空洞(一抗為兔抗高血糖素抗體);B,胰島周圍或胰腺淋巴組織內(nèi)的假陽性染色(箭頭):無一抗(以PBS替代),二抗為FITC-山羊抗小鼠抗體;C,胰島周圍或胰腺淋巴組織內(nèi)的假陽性染色(箭頭):一抗為小鼠抗高血糖抗體;D,無假陽性染色:一抗為兔抗高血糖素抗體;標(biāo)尺,20μm

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[6]四種石蠟包埋組織DNA提取方法的比較[J]. 袁亞婷,江岳鑫,尹小文,江興堂.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(24)
[7]苯和二甲苯對組織塊透明效果的比較[J]. 王立,袁芳.  解剖學(xué)雜志. 2005(04)



本文編號:3594445

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