核酸疫苗等基因藥物為親水性的大分子,容易被降解,不宜直接作為藥物使用,因此需要借助合適的載體傳遞。近年來(lái)納米技術(shù)在藥物傳遞中備受研究者的青睞,在基因治療中也被廣泛應(yīng)用。納米傳遞系統(tǒng)中研究較為成熟的是陽(yáng)離子脂質(zhì)體。在本論文中,我們首先制備了DOTAP/DOPE脂質(zhì)體;其次加入一種油相發(fā)展成陽(yáng)離子脂質(zhì)乳劑,將這兩種陽(yáng)離子脂質(zhì)載體與DNA孵育得到相應(yīng)的復(fù)合物;最后引入魚精蛋白,又得到陽(yáng)離子脂質(zhì)載體/魚精蛋白/DNA的三元復(fù)合物。主要工作如下:（1）采用薄膜超聲法制備陽(yáng)離子脂質(zhì)體,采用探頭超聲法制備陽(yáng)離子脂質(zhì)乳劑,對(duì)空白脂質(zhì)體和脂質(zhì)乳劑的粒徑、zeta電位、形貌和穩(wěn)定性進(jìn)行考察。結(jié)果表明制備工藝有較好的重復(fù)性,空白載體穩(wěn)定性較好。（2）制備了陽(yáng)離子脂質(zhì)體/DNA復(fù)合物、陽(yáng)離子脂質(zhì)乳劑/DNA復(fù)合物、陽(yáng)離子脂質(zhì)體/魚精蛋白/DNA復(fù)合物、陽(yáng)離子脂質(zhì)乳劑/魚精蛋白/DNA復(fù)合物。表征結(jié)果顯示N/P在2以上時(shí),DNA與陽(yáng)離子脂質(zhì)載體形成穩(wěn)定且?guī)д姷膹?fù)合物;核酸酶切保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明復(fù)合物能較好地保護(hù)DNA抵御核酸酶的降解。我們還對(duì)高濃度復(fù)合物的制備方法進(jìn)行了研究。（3）我們將4種復(fù)合物分別對(duì)CHO-... 

【文章來(lái)源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

DOTAP的結(jié)構(gòu)圖

表 2.2 陽(yáng)離子脂質(zhì)乳劑的粒徑及 zeta 電位.2 The particle size and zeta potential of cationic Average size（nm） PDI 148.5139.5141.8143.3±4.70.1620.2040.1460.170±0.030體和陽(yáng)離子脂質(zhì)乳劑的透射電鏡結(jié)果如圖構(gòu)，電鏡圖中空白脂質(zhì)載體的粒徑略小于的是納米粒子的水化粒徑。

圖 2.3 陽(yáng)離子脂質(zhì)乳劑透射電鏡圖 transmission electronic micrograph of cationic體物理穩(wěn)定性初步評(píng)價(jià) ℃或 37 ℃貯存 1 個(gè)月后，粒徑和 PD超聲后的納米粒子通常處于亞穩(wěn)態(tài)，釋放出來(lái)達(dá)到穩(wěn)態(tài)[70]，而且由于較高聚，其膠體穩(wěn)定性較好。離子和血清對(duì)納米載體的影響，使用 ，在 40 min 之內(nèi)，脂質(zhì)體的粒徑變化集，而乳劑的粒徑變化不顯著，放置約同的稀釋介質(zhì)孵育，考察作用 1 min 后養(yǎng)基 DMEM 為稀釋介質(zhì)，對(duì)脂質(zhì)體

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]PLGA微粒/納米粒基因載體的研究進(jìn)展[J]. 曾萍,彭明利,徐溢.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2010(11)
[2]殼聚糖基非病毒基因載體研究新進(jìn)展[J]. 劉決照,辛梅華,李明春.  化工進(jìn)展. 2010(08)
[3]聚乙二醇-殼聚糖共聚物作為基因傳遞載體的體外研究[J]. 張未,潘仕榮,張璇,羅昕,王持.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2008(08)
[4]殼聚糖季銨鹽的制備及其應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 周景潤(rùn),辛梅華,李明春.  化工進(jìn)展. 2008(05)
[5]殼聚糖作為基因載體及其改性(英文)[J]. 徐海娥,閆翠娥.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(14)
[6]粘膜免疫系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J]. 李國(guó)平,楊恬.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2001(06)
[7]口腔粘膜免疫研究進(jìn)展[J]. 楊偉平,姜軍松,倪愛(ài)民.  國(guó)外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊(cè). 2001(03)
[8]基因治療的現(xiàn)狀與展望[J]. 王瓞,宣海星,林其誰(shuí).  生命科學(xué). 2000(02)
[9]陽(yáng)性脂質(zhì)體及其介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染[J]. 吳雪梅,張富斌,鄧意輝,于彬,李煥秋.  中國(guó)藥學(xué)雜志. 1999(04)
[10]用于轉(zhuǎn)基因的陽(yáng)離子脂質(zhì)體[J]. 王瓞,林其誰(shuí).  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 1997(06)

博士論文
[1]靜脈注射用治療基因靶向傳遞系統(tǒng)的研究[D]. 孫遜.四川大學(xué) 2005
[2]增強(qiáng)靶向融合防齲DNA疫苗粘膜免疫效果的研究[D]. 李宇紅.武漢大學(xué) 2005
[3]靶向防齲DNA疫苗增強(qiáng)免疫效果與機(jī)制研究[D]. 賈榮.武漢大學(xué) 2004



本文編號(hào)：3569391