人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞移植能夠修復(fù)自身免疫性卵巢早衰小鼠卵巢功能
發(fā)布時(shí)間:2021-12-31 10:27
一、hPMSCs移植修復(fù)自身免疫性卵巢早衰小鼠卵巢功能作用及其與Treg細(xì)胞及TGF-β、IFN-γ的關(guān)系目的:檢測(cè)人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPMSCs)移植對(duì)自身免疫性卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)小鼠卵巢功能的修復(fù)作用,并探討該修復(fù)功能與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells,Treg cells)及轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子 β(transforming growth factor β,TGF-β)、干擾素 γ(interferon γ,IFN-γ)的關(guān)系。方法:利用小鼠透明帶多肽3(zona pellucida glycoprotein 3,ZP3)建立自身免疫性卵巢早衰小鼠模型,通過(guò)酶聯(lián)檢測(cè)(enzyme linked immunosorbent assay,ELIS A)定性檢測(cè)小鼠血清抗透明帶抗體(Anti-zona pellucida antibody,AZPAb)篩選小鼠后,部分給予尾靜脈注射hPMSCs懸液處理。通過(guò)HE染色(histopat...
【文章來(lái)源】:濱州醫(yī)學(xué)院山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:61 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1?hPMSCs表型及分化鑒定(A)綠色直方圖代表同型對(duì)照染色;藍(lán)色直方圖代表細(xì)??胞表面特殊標(biāo)記表達(dá)
transplantation.?Data?are?presented?as?mean?±?SD.??1.3.4移植前后小鼠卵巢組織形態(tài)變化??正常小鼠卵巢包含大量各級(jí)卵泡,包括原始卵泡(圖1-3?(A-a)),初級(jí)??卵泡(圖1-3?(A-b)),次級(jí)卵泡(圖1-3?(A-c))及閉鎖卵泡(圖1-3?(A-d));??經(jīng)ZP3處理后,小鼠卵巢萎縮、間質(zhì)纖維化(圖3B),生長(zhǎng)卵泡(尤其是竇??性卵泡)顯著減少(圖1-31)。經(jīng)hPMSCs移植處理后,小鼠卵巢中初級(jí)卵泡??數(shù)(12.80±4.21)及次級(jí)卵泡數(shù)(6.13±2.17)較?POF?組(4.63±0.92?及?3.80±0.84)??均顯著增加(P<0.05),同時(shí),卵巢組織可見(jiàn)大量血管增生,可能是由于干細(xì)??胞治療引起血管生成及抑制凋亡作用[39],增加的血流有助于卵巢功能恢復(fù)。??13??
2.3.2?GCs培養(yǎng)及鑒定??倒置相差顯微鏡觀察結(jié)果顯示:分離的卵巢GCs培養(yǎng)24?h后,呈梭形或??多角形不規(guī)則、貼壁樣生長(zhǎng)(圖2-1A)。培養(yǎng)5?d可長(zhǎng)滿皿底。采用GCs特異??性抗體(FSHR抗體)免疫熒光染色鑒定GCs,結(jié)果顯示:培養(yǎng)的細(xì)胞中有??FSHR陽(yáng)性表達(dá),且染色主要定位于細(xì)胞質(zhì)(圖2-1?(B-D))。??__8M??圖2-1?GCs形態(tài)及鑒定。GCs為梭形或多角形形態(tài)(圖A,x2〇〇);?DAPI染色(藍(lán)??色熒光)代表GCs核(圖B,?x400);?Dylight?549?(紅色熒光)代表細(xì)胞質(zhì)中FSHR陽(yáng)??性表達(dá)(圖C,?MOO);雙染色(藍(lán)色及紅色)定位顯示GCs細(xì)胞上FSHR表達(dá)(圖D,??x400)〇??F;igure?2-1.?Morphology?and?identification?of?GCs?(A-D).?GCs?were?shown?as?spindle-shaped??or?polygon?morphology?(A,?x200).?DAP1?staining?(blue?fluorescence)?indicates?the?GCs??nucleus?(B,?><400).?FSI?IR-positive?expression?were?identified?under?Dylight?549?(red??fluorescence)(C
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]針刺治療對(duì)卵巢早衰大鼠PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路的影響[J]. 張毅敏,于斌,陳佳,趙志生,王嘉麗,黃法森,林月娥,王夢(mèng)薇,張玉佩,魏波. 中國(guó)針灸. 2015(01)
[2]卵泡刺激素促進(jìn)卵巢顆粒細(xì)胞增殖分化的信號(hào)通路的研究進(jìn)展[J]. 李曉雯,郎朗,季宇彬,王冰冰,趙春麗. 北京聯(lián)合大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2012(04)
[3]PKH26標(biāo)記的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在大鼠化療性卵巢早衰模型中的卵巢遷移[J]. 朱少芳,何援利,付霞菲,卓光生. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展. 2011(02)
本文編號(hào):3560094
【文章來(lái)源】:濱州醫(yī)學(xué)院山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:61 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1?hPMSCs表型及分化鑒定(A)綠色直方圖代表同型對(duì)照染色;藍(lán)色直方圖代表細(xì)??胞表面特殊標(biāo)記表達(dá)
transplantation.?Data?are?presented?as?mean?±?SD.??1.3.4移植前后小鼠卵巢組織形態(tài)變化??正常小鼠卵巢包含大量各級(jí)卵泡,包括原始卵泡(圖1-3?(A-a)),初級(jí)??卵泡(圖1-3?(A-b)),次級(jí)卵泡(圖1-3?(A-c))及閉鎖卵泡(圖1-3?(A-d));??經(jīng)ZP3處理后,小鼠卵巢萎縮、間質(zhì)纖維化(圖3B),生長(zhǎng)卵泡(尤其是竇??性卵泡)顯著減少(圖1-31)。經(jīng)hPMSCs移植處理后,小鼠卵巢中初級(jí)卵泡??數(shù)(12.80±4.21)及次級(jí)卵泡數(shù)(6.13±2.17)較?POF?組(4.63±0.92?及?3.80±0.84)??均顯著增加(P<0.05),同時(shí),卵巢組織可見(jiàn)大量血管增生,可能是由于干細(xì)??胞治療引起血管生成及抑制凋亡作用[39],增加的血流有助于卵巢功能恢復(fù)。??13??
2.3.2?GCs培養(yǎng)及鑒定??倒置相差顯微鏡觀察結(jié)果顯示:分離的卵巢GCs培養(yǎng)24?h后,呈梭形或??多角形不規(guī)則、貼壁樣生長(zhǎng)(圖2-1A)。培養(yǎng)5?d可長(zhǎng)滿皿底。采用GCs特異??性抗體(FSHR抗體)免疫熒光染色鑒定GCs,結(jié)果顯示:培養(yǎng)的細(xì)胞中有??FSHR陽(yáng)性表達(dá),且染色主要定位于細(xì)胞質(zhì)(圖2-1?(B-D))。??__8M??圖2-1?GCs形態(tài)及鑒定。GCs為梭形或多角形形態(tài)(圖A,x2〇〇);?DAPI染色(藍(lán)??色熒光)代表GCs核(圖B,?x400);?Dylight?549?(紅色熒光)代表細(xì)胞質(zhì)中FSHR陽(yáng)??性表達(dá)(圖C,?MOO);雙染色(藍(lán)色及紅色)定位顯示GCs細(xì)胞上FSHR表達(dá)(圖D,??x400)〇??F;igure?2-1.?Morphology?and?identification?of?GCs?(A-D).?GCs?were?shown?as?spindle-shaped??or?polygon?morphology?(A,?x200).?DAP1?staining?(blue?fluorescence)?indicates?the?GCs??nucleus?(B,?><400).?FSI?IR-positive?expression?were?identified?under?Dylight?549?(red??fluorescence)(C
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]針刺治療對(duì)卵巢早衰大鼠PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路的影響[J]. 張毅敏,于斌,陳佳,趙志生,王嘉麗,黃法森,林月娥,王夢(mèng)薇,張玉佩,魏波. 中國(guó)針灸. 2015(01)
[2]卵泡刺激素促進(jìn)卵巢顆粒細(xì)胞增殖分化的信號(hào)通路的研究進(jìn)展[J]. 李曉雯,郎朗,季宇彬,王冰冰,趙春麗. 北京聯(lián)合大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2012(04)
[3]PKH26標(biāo)記的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在大鼠化療性卵巢早衰模型中的卵巢遷移[J]. 朱少芳,何援利,付霞菲,卓光生. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展. 2011(02)
本文編號(hào):3560094
本文鏈接:http://sikaile.net/xiyixuelunwen/3560094.html
最近更新
教材專著