人胎盤間充質干細胞移植能夠修復自身免疫性卵巢早衰小鼠卵巢功能
發(fā)布時間:2021-12-31 10:27
一、hPMSCs移植修復自身免疫性卵巢早衰小鼠卵巢功能作用及其與Treg細胞及TGF-β、IFN-γ的關系目的:檢測人胎盤間充質干細胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPMSCs)移植對自身免疫性卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)小鼠卵巢功能的修復作用,并探討該修復功能與調(diào)節(jié)性T細胞(regulatory T cells,Treg cells)及轉錄生長因子 β(transforming growth factor β,TGF-β)、干擾素 γ(interferon γ,IFN-γ)的關系。方法:利用小鼠透明帶多肽3(zona pellucida glycoprotein 3,ZP3)建立自身免疫性卵巢早衰小鼠模型,通過酶聯(lián)檢測(enzyme linked immunosorbent assay,ELIS A)定性檢測小鼠血清抗透明帶抗體(Anti-zona pellucida antibody,AZPAb)篩選小鼠后,部分給予尾靜脈注射hPMSCs懸液處理。通過HE染色(histopat...
【文章來源】:濱州醫(yī)學院山東省
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1?hPMSCs表型及分化鑒定(A)綠色直方圖代表同型對照染色;藍色直方圖代表細??胞表面特殊標記表達
transplantation.?Data?are?presented?as?mean?±?SD.??1.3.4移植前后小鼠卵巢組織形態(tài)變化??正常小鼠卵巢包含大量各級卵泡,包括原始卵泡(圖1-3?(A-a)),初級??卵泡(圖1-3?(A-b)),次級卵泡(圖1-3?(A-c))及閉鎖卵泡(圖1-3?(A-d));??經(jīng)ZP3處理后,小鼠卵巢萎縮、間質纖維化(圖3B),生長卵泡(尤其是竇??性卵泡)顯著減少(圖1-31)。經(jīng)hPMSCs移植處理后,小鼠卵巢中初級卵泡??數(shù)(12.80±4.21)及次級卵泡數(shù)(6.13±2.17)較?POF?組(4.63±0.92?及?3.80±0.84)??均顯著增加(P<0.05),同時,卵巢組織可見大量血管增生,可能是由于干細??胞治療引起血管生成及抑制凋亡作用[39],增加的血流有助于卵巢功能恢復。??13??
2.3.2?GCs培養(yǎng)及鑒定??倒置相差顯微鏡觀察結果顯示:分離的卵巢GCs培養(yǎng)24?h后,呈梭形或??多角形不規(guī)則、貼壁樣生長(圖2-1A)。培養(yǎng)5?d可長滿皿底。采用GCs特異??性抗體(FSHR抗體)免疫熒光染色鑒定GCs,結果顯示:培養(yǎng)的細胞中有??FSHR陽性表達,且染色主要定位于細胞質(圖2-1?(B-D))。??__8M??圖2-1?GCs形態(tài)及鑒定。GCs為梭形或多角形形態(tài)(圖A,x2〇〇);?DAPI染色(藍??色熒光)代表GCs核(圖B,?x400);?Dylight?549?(紅色熒光)代表細胞質中FSHR陽??性表達(圖C,?MOO);雙染色(藍色及紅色)定位顯示GCs細胞上FSHR表達(圖D,??x400)〇??F;igure?2-1.?Morphology?and?identification?of?GCs?(A-D).?GCs?were?shown?as?spindle-shaped??or?polygon?morphology?(A,?x200).?DAP1?staining?(blue?fluorescence)?indicates?the?GCs??nucleus?(B,?><400).?FSI?IR-positive?expression?were?identified?under?Dylight?549?(red??fluorescence)(C
【參考文獻】:
期刊論文
[1]針刺治療對卵巢早衰大鼠PI3K/Akt/mTOR信號通路的影響[J]. 張毅敏,于斌,陳佳,趙志生,王嘉麗,黃法森,林月娥,王夢薇,張玉佩,魏波. 中國針灸. 2015(01)
[2]卵泡刺激素促進卵巢顆粒細胞增殖分化的信號通路的研究進展[J]. 李曉雯,郎朗,季宇彬,王冰冰,趙春麗. 北京聯(lián)合大學學報(自然科學版). 2012(04)
[3]PKH26標記的人臍帶間充質干細胞在大鼠化療性卵巢早衰模型中的卵巢遷移[J]. 朱少芳,何援利,付霞菲,卓光生. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展. 2011(02)
本文編號:3560094
【文章來源】:濱州醫(yī)學院山東省
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1?hPMSCs表型及分化鑒定(A)綠色直方圖代表同型對照染色;藍色直方圖代表細??胞表面特殊標記表達
transplantation.?Data?are?presented?as?mean?±?SD.??1.3.4移植前后小鼠卵巢組織形態(tài)變化??正常小鼠卵巢包含大量各級卵泡,包括原始卵泡(圖1-3?(A-a)),初級??卵泡(圖1-3?(A-b)),次級卵泡(圖1-3?(A-c))及閉鎖卵泡(圖1-3?(A-d));??經(jīng)ZP3處理后,小鼠卵巢萎縮、間質纖維化(圖3B),生長卵泡(尤其是竇??性卵泡)顯著減少(圖1-31)。經(jīng)hPMSCs移植處理后,小鼠卵巢中初級卵泡??數(shù)(12.80±4.21)及次級卵泡數(shù)(6.13±2.17)較?POF?組(4.63±0.92?及?3.80±0.84)??均顯著增加(P<0.05),同時,卵巢組織可見大量血管增生,可能是由于干細??胞治療引起血管生成及抑制凋亡作用[39],增加的血流有助于卵巢功能恢復。??13??
2.3.2?GCs培養(yǎng)及鑒定??倒置相差顯微鏡觀察結果顯示:分離的卵巢GCs培養(yǎng)24?h后,呈梭形或??多角形不規(guī)則、貼壁樣生長(圖2-1A)。培養(yǎng)5?d可長滿皿底。采用GCs特異??性抗體(FSHR抗體)免疫熒光染色鑒定GCs,結果顯示:培養(yǎng)的細胞中有??FSHR陽性表達,且染色主要定位于細胞質(圖2-1?(B-D))。??__8M??圖2-1?GCs形態(tài)及鑒定。GCs為梭形或多角形形態(tài)(圖A,x2〇〇);?DAPI染色(藍??色熒光)代表GCs核(圖B,?x400);?Dylight?549?(紅色熒光)代表細胞質中FSHR陽??性表達(圖C,?MOO);雙染色(藍色及紅色)定位顯示GCs細胞上FSHR表達(圖D,??x400)〇??F;igure?2-1.?Morphology?and?identification?of?GCs?(A-D).?GCs?were?shown?as?spindle-shaped??or?polygon?morphology?(A,?x200).?DAP1?staining?(blue?fluorescence)?indicates?the?GCs??nucleus?(B,?><400).?FSI?IR-positive?expression?were?identified?under?Dylight?549?(red??fluorescence)(C
【參考文獻】:
期刊論文
[1]針刺治療對卵巢早衰大鼠PI3K/Akt/mTOR信號通路的影響[J]. 張毅敏,于斌,陳佳,趙志生,王嘉麗,黃法森,林月娥,王夢薇,張玉佩,魏波. 中國針灸. 2015(01)
[2]卵泡刺激素促進卵巢顆粒細胞增殖分化的信號通路的研究進展[J]. 李曉雯,郎朗,季宇彬,王冰冰,趙春麗. 北京聯(lián)合大學學報(自然科學版). 2012(04)
[3]PKH26標記的人臍帶間充質干細胞在大鼠化療性卵巢早衰模型中的卵巢遷移[J]. 朱少芳,何援利,付霞菲,卓光生. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展. 2011(02)
本文編號:3560094
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