目的:在制備抗心肌Na⁺/Ca²⁺交換體α-1_{（138-177）}和α-2_{（840-877）}兩種多克隆抗體的基礎(chǔ)上,分別觀察它們對(duì)大鼠心肌細(xì)胞Na⁺/Ca²⁺交換體、L型鈣通道、瞬時(shí)外向鉀通道和內(nèi)向整流鉀通道電流的影響。方法:1.抗體制備和純化:用化學(xué)合成的Na⁺/Ca²⁺交換體α-1_{（138-177）}和α-2_{（840-877）}短肽對(duì)新西蘭大耳白兔進(jìn)行主動(dòng)免疫獲取抗血清,間接ELISA法檢測(cè)免疫后抗血清效價(jià),用Protein A層析柱對(duì)抗體進(jìn)行親和純化。2.膜片鉗全細(xì)胞記錄:應(yīng)用膜片鉗全細(xì)胞記錄模式觀察抗心肌Na⁺/Ca²⁺交換體α-1_{（138-177）}和α-2_{（840-877）}兩種多克隆抗體分別對(duì)心肌細(xì)胞Na⁺/Ca²⁺交換電流、L型鈣電流... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：40 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

α-1抗體純度的SDS-PAGE檢測(cè)1.蛋白marker；2.ProteinA純化后抗體：在變性條件下，抗體解離為重鏈（50kD）和輕鏈（25kD）兩條帶

4討 論人工合成的 α-1 和 α-2 肽段為抗原，分別主動(dòng)免疫新西蘭大耳白備并獲得了高濃度、高效價(jià)的 α-1 和 α-2 抗體，為下一步對(duì)其 SDS-PAGE 檢測(cè) 1.蛋白 marker；2. ProteinA 純化后抗體：在變性條件下，抗體解離

大鼠心肌細(xì)胞 L 型鈣電流（ICa-L） 的抑制作用 a.對(duì)照； b、c 分別為加入 α-l 抗體 10 型鈣電流（ICa-L）曲線；d. 細(xì)胞外液洗脫。大鼠心肌細(xì)胞 L 型鈣電流（ICa-L）的作用 L 型鈣電流測(cè)定方法40-877）抗體對(duì) L 型鈣電流也具有抑制作用。在 1-104nmol/L 濃度范型鈣電流從給藥前的（29.83±6.97）分別降至（25.98±3.33）、（25、（24.62±8.33）、（16.80±5.71）（p<0.01）pA/pF（表 2.4，圖 2.4）表 2.4 α-2 抗體對(duì)大鼠心肌細(xì)胞 L 型鈣電流的作用（ x ±s）體（nmol /L） n 電流密度（pA/p0 11 29.83±6.971 6 25.98±3.3310 6 25.76±4.43

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]溫度和胞內(nèi)鈉、ATP及酸堿度對(duì)心室肌細(xì)胞鈉鈣交換電流的調(diào)節(jié)[J]. 周紅義,韓重陽(yáng),王曉良.  生理學(xué)報(bào). 2006(02)
[2]抗鈉-鈣交換體α-1和α-2重復(fù)序列抗體的制備和純化（英文）[J]. 封啟龍,范國(guó)權(quán),趙嘉惠,趙畫(huà)晨,吳博威.  山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2005(04)



本文編號(hào)：3545845