目的:構建家蠅C型凝集素基因（Mdctl）原核表達體系,對Mdctl基因及編碼蛋白進行生物信息學分析。方法:采用生物信息學方法,分析Mdctl基因及編碼蛋白;將構建的pET28a（+）/Mdctl重組表達質(zhì)粒轉化至大腸桿菌BL21-DE3中,以異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）誘導表達重組蛋白并通過SDS-PAGE對表達產(chǎn)物進行分析;Ni-IDA法純化重組蛋白,Western-Blot對其鑒定。結果:生物信息學分析顯示,Mdctl基因開放閱讀框全長333 bp,共編碼110個氨基酸,理論分子量為1313 kDa,等電點為449,信號肽位于1～22位氨基酸之間;Mdctl蛋白中存在Clect結構域,屬于C型凝集素超家族;Mdctl重組蛋白在大腸桿菌BL21-DE3中主要以包涵體形式表達,重組蛋白的相對分子質(zhì)量與Mdctl蛋白兩端融合6×His標簽后的總分子量相一致。結論:成功構建Mdctl原核表達系統(tǒng),并獲得重組蛋白。 

【文章來源】：貴州醫(yī)科大學學報. 2020,45(02)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

總RNA的瓊脂糖凝膠電泳

pMD19-T/Mdctl重組菌落PCR的瓊脂糖凝膠電泳

Mdctl純化蛋白的鑒定

【參考文獻】：
期刊論文
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