第一部分H7亞型禽流感DNA疫苗的免疫原優(yōu)化研究目的：通過優(yōu)化DNA疫苗的免疫原設(shè)計(jì)提高H7禽流感疫苗的免疫原性。方法：以2003年H7亞型禽流感病毒荷蘭株A/Netherlands/219/2003（H7N7）血凝素（HA）為免疫原,設(shè)計(jì)三種表達(dá)血凝素的DNA疫苗。第一種以自身引導(dǎo)序列表達(dá)全長(zhǎng)HA；第二種以人纖溶酶原激活物（tPA）替換自身的引導(dǎo)序列表達(dá)全長(zhǎng)HA；第三種去除HA的跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),以tPA為引導(dǎo)序列表達(dá)截短的HA。以新西蘭兔為動(dòng)物模型進(jìn)行免疫。ELISA檢測(cè)免疫兔血清中HA特異性結(jié)合抗體的水平,血凝抑制實(shí)驗(yàn)和假病毒中和實(shí)驗(yàn)檢測(cè)免疫兔血清中針對(duì)同源性和異源性H7禽流感病毒的保護(hù)性抗體水平,收集3例2013年H7N9禽流感患者血清,分析其對(duì)本實(shí)驗(yàn)疫苗株H7禽流感病毒的交叉中和能力。結(jié)果：三種表達(dá)血凝素的DNA疫苗均誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)兔產(chǎn)生高水平的結(jié)合抗體,無論是針對(duì)同源性還是異源性的H7禽流感病毒,均以tPA為引導(dǎo)序列表達(dá)全長(zhǎng)HA的DNA疫苗誘導(dǎo)的功能性抗體的水平最高,以自身引導(dǎo)序列表達(dá)全長(zhǎng)HA的DNA疫苗次之,表達(dá)截短HA的DNA疫苗誘導(dǎo)功能性抗體的能力最差。2013年H7N9禽流... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：174 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

7HANL219DNA疫苗的構(gòu)建

DNA疫苗酶切鑒定圖

19.dTM (未 11切}4. H7 HA HL219.wt (BamH l+Pst 1)5. H7 HA HL219.wt (BamH l+Nhe I)6. H7 HA HL219.wt (BamH 丨+Hhe I)圖2.DNA疫苗酶切鑒定圖3. ELISA法檢測(cè)免疫兔血清HA特異性抗體應(yīng)用ELISA檢測(cè)動(dòng)物免疫血清中HA特異性抗體，結(jié)果表明在DNA疫苗2次免疫后2周（第4周）可以檢測(cè)到HA特異性抗體，第3次免疫后2周（第6周）抗體水平進(jìn)一步升高（圖3A)。檢測(cè)第4次免疫后兩周HA特異性抗體的滴度，三種DNA疫苗免疫組均產(chǎn)生高水平的HA抗體（104-105)(圖3B)�？蛰d體免疫組血清未檢測(cè)到HA特異性抗體。45

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Kozak序列對(duì)金黃色葡萄球菌黏附因子FnBPA-A DNA疫苗誘導(dǎo)小鼠免疫應(yīng)答的影響[J]. 蘇艷,王世民,邵俊高,張寶江,韋海娜.  生物工程學(xué)報(bào). 2013(04)
[2]密碼子優(yōu)化的中國HIV-1流行亞型gp120共識(shí)序列核酸疫苗的構(gòu)建及其免疫原性的初步研究[J]. 張璐,張春華,李軍,黃祖瑚,盧山,王世霞.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2008(09)
[3]艾滋病預(yù)防和治療的回顧與展望[J]. 盧山.  微生物與感染. 2007(01)
[4]中國3歲以上人群乙型肝炎血清流行病學(xué)研究[J]. 梁曉峰,陳園生,王曉軍,賀雄,陳麗娟,王駿,林長(zhǎng)纓,白呼群,嚴(yán)俊,崔鋼,于競(jìng)進(jìn).  中華流行病學(xué)雜志. 2005(09)
[5]我國乙型肝炎疫苗免疫[J]. 莊輝.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2004(02)
[6]我國乙型肝炎防治現(xiàn)狀及目標(biāo)[J]. 莊輝.  中華內(nèi)科雜志. 2008 (10)



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