目的探討PLA2/LPC途徑在FFAs致肝細胞脂性凋亡中的作用及分子機制。方法常規(guī)培養(yǎng)張氏肝細胞,采用四甲基偶氮唑鹽（MTT）法觀察飽和脂肪酸（棕櫚酸,PA）和PLA2抑制劑作用18小時后細胞的增殖情況,用Hoechst33258染色和AnnexinV-PI染色流式細胞術檢測細胞凋亡；尼羅紅染色檢測細胞內(nèi)脂質(zhì)含量；分別運用熒光定量PCR及Western-blot方法在mRNA水平及蛋白水平檢測三種PLA2亞型（sPLA2、cPLA2、iPLA2）的表達,用生化反應酶法檢測細胞中裂解液中LPC水平。結果PA干預后的肝細胞細胞增殖抑制率隨PA作用時間延長、濃度增加而進行性增加,細胞凋亡明顯增加（P<0.05）；尼羅紅染色顯示PA并未引起細胞內(nèi)大量脂肪蓄積；PA誘導過程中,三種PLA2亞型表達明顯增加；且PA干預后肝細胞內(nèi)LPC含量增加。iPLA2特異性抑制劑（BEL）,cPLA2特異性抑制劑（AACOCF3）和sPLA2抑制劑（sPLA2-IIA InhibitorⅠ）分別與PA共孵育18小時后,細胞活性,細胞凋亡率較PA單獨孵育明顯改善。BEL、sPLA2-IIA Inhibito... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

飽和脂肪酸(棕桐酸)對肝細胞活性的影響

050100200300400600COr訓二sntr日 tionOfpA圖1一1飽和脂肪酸(棕桐酸)對肝細胞活性的影響(2)不飽和脂肪酸(油酸)對肝細胞株細胞活性的影響肝細胞與不同濃度油酸共同孵育12、18、24小時后，油酸處理組肝細胞活性與正常對照組相比未見明顯改變。120100-悶卜-12怡 ~18hs24怡一一一談 42680000歲一一乃者.不鑒一O 050100200300400600COnCe漢r日廿 OnOfOA圖1一2不飽和脂肪酸(油酸)對肝細胞活性的影響

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【參考文獻】：
期刊論文
[1]肥胖兒童血清脂聯(lián)素水平與非酒精性脂肪性肝病的關系[J]. 方燕蘭,梁黎,鄒朝春,洪芳,傅君芬.  中華肝臟病雜志. 2006(10)
[2]中重度肥胖青少年的常見并發(fā)癥[J]. 朱建芳,梁黎,王春林,鄒朝春.  實用兒科臨床雜志. 2006(19)
[3]肥胖兒童非酒精性脂肪肝炎發(fā)病狀況及機制探討[J]. 傅君芬,梁黎,王春林,洪芳,董關萍,李筠.  浙江大學學報(醫(yī)學版). 2006(01)
[4]高濃度游離脂肪酸對胰島細胞凋亡及相關基因表達的影響[J]. 何慶,王保平,劉銘,蘇京,王晶,陳克勤,尹濰.  天津醫(yī)藥. 2004(05)
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本文編號：3471510