目的探討PLA2/LPC途徑在FFAs致肝細(xì)胞脂性凋亡中的作用及分子機(jī)制。方法常規(guī)培養(yǎng)張氏肝細(xì)胞,采用四甲基偶氮唑鹽（MTT）法觀察飽和脂肪酸（棕櫚酸,PA）和PLA2抑制劑作用18小時(shí)后細(xì)胞的增殖情況,用Hoechst33258染色和AnnexinV-PI染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡；尼羅紅染色檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量；分別運(yùn)用熒光定量PCR及Western-blot方法在mRNA水平及蛋白水平檢測(cè)三種PLA2亞型（sPLA2、cPLA2、iPLA2）的表達(dá),用生化反應(yīng)酶法檢測(cè)細(xì)胞中裂解液中LPC水平。結(jié)果PA干預(yù)后的肝細(xì)胞細(xì)胞增殖抑制率隨PA作用時(shí)間延長(zhǎng)、濃度增加而進(jìn)行性增加,細(xì)胞凋亡明顯增加（P<0.05）；尼羅紅染色顯示PA并未引起細(xì)胞內(nèi)大量脂肪蓄積；PA誘導(dǎo)過(guò)程中,三種PLA2亞型表達(dá)明顯增加；且PA干預(yù)后肝細(xì)胞內(nèi)LPC含量增加。iPLA2特異性抑制劑（BEL）,cPLA2特異性抑制劑（AACOCF3）和sPLA2抑制劑（sPLA2-IIA InhibitorⅠ）分別與PA共孵育18小時(shí)后,細(xì)胞活性,細(xì)胞凋亡率較PA單獨(dú)孵育明顯改善。BEL、sPLA2-IIA Inhibito... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

飽和脂肪酸(棕桐酸)對(duì)肝細(xì)胞活性的影響

050100200300400600COr訓(xùn)二sntr日 tionOfpA圖1一1飽和脂肪酸(棕桐酸)對(duì)肝細(xì)胞活性的影響(2)不飽和脂肪酸(油酸)對(duì)肝細(xì)胞株細(xì)胞活性的影響肝細(xì)胞與不同濃度油酸共同孵育12、18、24小時(shí)后，油酸處理組肝細(xì)胞活性與正常對(duì)照組相比未見(jiàn)明顯改變。120100-悶卜-12怡 ~18hs24怡一一一談 42680000歲一一乃者.不鑒一O 050100200300400600COnCe漢r日廿 OnOfOA圖1一2不飽和脂肪酸(油酸)對(duì)肝細(xì)胞活性的影響

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肥胖兒童血清脂聯(lián)素水平與非酒精性脂肪性肝病的關(guān)系[J]. 方燕蘭,梁黎,鄒朝春,洪芳,傅君芬.  中華肝臟病雜志. 2006(10)
[2]中重度肥胖青少年的常見(jiàn)并發(fā)癥[J]. 朱建芳,梁黎,王春林,鄒朝春.  實(shí)用兒科臨床雜志. 2006(19)
[3]肥胖兒童非酒精性脂肪肝炎發(fā)病狀況及機(jī)制探討[J]. 傅君芬,梁黎,王春林,洪芳,董關(guān)萍,李筠.  浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2006(01)
[4]高濃度游離脂肪酸對(duì)胰島細(xì)胞凋亡及相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 何慶,王保平,劉銘,蘇京,王晶,陳克勤,尹濰.  天津醫(yī)藥. 2004(05)
[5]脂聯(lián)素與幼兔非酒精性脂肪性肝病的相關(guān)性[J]. 方燕蘭,梁黎,傅君芬.  中華肝臟病雜志. 2007 (04)



本文編號(hào)：3471510