Usher綜合癥會導(dǎo)致眼盲和耳聾,是視力和聽力方面最常見的基因疾病。其中Ⅱ型（USH2）患者表現(xiàn)為先天性中重度的聽力受損和正常的前庭反應(yīng),是發(fā)病最多的類型,也是備受關(guān)注的研究熱點(diǎn)。Usher綜合癥Ⅱ型有三個已確認(rèn)的相關(guān)蛋白:usherin、GPR98（G protein-couple receptor 98）以及whirlin,它們在體內(nèi)會形成USH2蛋白復(fù)合體,當(dāng)某個蛋白出現(xiàn)問題不能形成復(fù)合體就會導(dǎo)致USH2的發(fā)病。其中,usherin和GPR98蛋白的大部分在細(xì)胞膜外,C端均有一個PDZ結(jié)合結(jié)構(gòu)域（PBM）。whirlin是一種支架蛋白,包含3個PDZ結(jié)構(gòu)域和一個脯氨酸富集區(qū)（PR）,whirlin在細(xì)胞內(nèi)起到一個連接USH2蛋白復(fù)合體的作用,是構(gòu)成USH2蛋白復(fù)合體的必要組成部分,所以與whirlin能相互作用的蛋白常被認(rèn)為有可能是USH2蛋白復(fù)合體的成員。研究表明,espin與whirlin都分布于感覺細(xì)胞的微絨毛中,并且在體外可以相互作用,但是espin與whirlin相互作用的機(jī)制尚不清楚。本文構(gòu)建了兩個能夠表達(dá)whirlin蛋白N端和C端的重組載體,其中N端片段包含前兩個... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 前言
    1 Usher綜合癥概述
    2 USH2概述
        2.1 USH2基因
        2.2 USH2蛋白的亞細(xì)胞定位
        2.3 USH2蛋白復(fù)合體和與其存在相互作用的蛋白
        2.4 USH2復(fù)合體的功能和USH2的發(fā)病機(jī)制
        2.5 USH2的治療研究
    3 Espin簡介
        3.1 Espin的結(jié)構(gòu)與活性
        3.2 耳聾和人類espin基因突變
    4 研究的目的及意義
第二章 材料與方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 試劑和試劑盒
        1.2 菌株、載體和細(xì)胞
        1.3 儀器設(shè)備
        1.4 實(shí)驗(yàn)試劑的配制
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 whirlin片段的重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.2 Whirlin片段與espin在細(xì)胞中共定位
        2.3 Whirlin片段與espin的相互作用
第三章 結(jié)果
    1 Whirlin片段重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        1.1 pEGFP-C1-whirlin-N載體的鑒定
        1.2 pEGFP-C1-whirlin-C載體的鑒定
        1.3 小結(jié)
    2 Whirlin片段與espin在細(xì)胞中定位
        2.1 Whirlin-N端與espin在細(xì)胞中共定位
        2.2 Whirlin-C端與espin在細(xì)胞中無共定位
        2.3 小結(jié)
    3 Whirlin與espin之間的相互作用
        3.1 Whirlin結(jié)合不與actin結(jié)合的espin
        3.2 whirlin-N端與espin相互作用
第四章 討論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3470920