目的探討大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSC）分泌的外泌體（BMSC-Exo）對原代軟骨細(xì)胞遷移、增殖和凋亡的影響。方法超速離心結(jié)合超濾濃縮法提取BMSC-Exo,通過透射電鏡和Western blot法鑒定外泌體。分別使用濃度為25、50和100μg/ml的BMSC-Exo處理軟骨細(xì)胞,劃痕實驗檢測軟骨細(xì)胞的遷移,CCK-8法檢測軟骨細(xì)胞的增殖,流式細(xì)胞術(shù)檢測軟骨細(xì)胞的凋亡。為模擬骨關(guān)節(jié)炎（OA）病理狀態(tài),同時設(shè)置IL-1β（10ng/ml）對照組。結(jié)果與細(xì)胞培養(yǎng)基對照組比較,BMSCExo作用使軟骨細(xì)胞的劃痕愈合率顯著升高（12h,P <0. 05; 24h,P <0. 01）,細(xì)胞增殖速度明顯加快（P <0. 01）,細(xì)胞凋亡比例顯著降低（P <0. 01）,且均存在時間和劑量依賴性。IL-1β刺激可抑制軟骨細(xì)胞的遷移和增殖,促進軟骨細(xì)胞的凋亡,而BMSCExo可顯著削減IL-1β的作用效果。結(jié)論 BMSC-Exo可促進軟骨細(xì)胞的遷移運動和增殖能力,抑制軟骨細(xì)胞發(fā)生凋亡,可對軟骨細(xì)胞的生長發(fā)揮重要的調(diào)控作用。 

【文章來源】：醫(yī)學(xué)研究雜志. 2020,49(01)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

大鼠BMSCs的成骨、成脂誘導(dǎo)分化

大鼠BMSC-Exo的鑒定

MSC屬多功能干細(xì)胞，存在于骨髓、脂肪等多種組織，具有促生長、抗凋亡、抗炎和免疫抑制等功能，并有來源廣、易獲取、多向分化等特性，廣泛應(yīng)用于再生細(xì)胞治療領(lǐng)域，特別是OA這種退行性疾病[2]。自20世紀(jì)90年代起，大量的臨床研究證實直接關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射MSCs或?qū)⒑蠱SC的材料植入體內(nèi)，均可有效治療輕度至中度OA的軟骨缺損，產(chǎn)生透明樣軟骨，減輕患者疼痛，提高生活質(zhì)量[2～12]。盡管應(yīng)用MSC治療OA具有損傷小、見效快、療效好等優(yōu)點，但該方法花費巨大且存在醫(yī)學(xué)倫理學(xué)爭議、患者體重限制、有惡性轉(zhuǎn)化風(fēng)險等諸多限制因素，使得其臨床應(yīng)用受到局限。近年來，大量研究證實MSC的治療效果主要來自于其旁分泌功能[2～4]。Exosome是一種重要的細(xì)胞旁分泌效應(yīng)成分，屬于細(xì)胞外囊泡(extracellular vesicle,EV)的一種，經(jīng)由內(nèi)體途徑產(chǎn)生，幾乎所有細(xì)胞都可分泌[13]。Exosome直徑30～100nm，由磷脂雙分子層和其內(nèi)包裹的脂類、蛋白質(zhì)、核酸等生物信息物質(zhì)構(gòu)成，在細(xì)胞間信息傳遞中發(fā)揮重要作用[13]。研究證實，MSC-Exo具有與其來源親本干細(xì)胞類似的功能[4,13]，在心肌梗死以及腦、肺、肝臟和急性腎損傷等疾病的動物模型中均可發(fā)揮良好的損傷修復(fù)效果[5,13]。最新研究結(jié)果顯示，基于MSC-Exo的抗炎和促生長作用，其可促進OA關(guān)節(jié)軟骨再生，但相關(guān)機制尚有待于深入研究[6～9]。軟骨細(xì)胞是關(guān)節(jié)軟骨內(nèi)唯一的細(xì)胞成分，目前有關(guān)MSC-Exo對軟骨細(xì)胞作用效果的研究較少。


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