發(fā)布時(shí)間：2021-10-20 08:37

　　目的:秋水仙堿作為一種特殊的抗炎藥物,能有效的預(yù)防術(shù)后房顫的發(fā)生,然而其機(jī)制尚不明確。因此本課題擬構(gòu)建大鼠無(wú)菌性心包炎（SP）模型,研究秋水仙堿對(duì)無(wú)菌性心包炎術(shù)后房顫發(fā)生的影響及其機(jī)制。方法:在SD大鼠心房表面均勻播撒無(wú)菌性滑石粉,建立大鼠無(wú)菌性心包炎模型,應(yīng)用食道心房調(diào)博技術(shù)檢測(cè)房顫誘發(fā)率和房顫持續(xù)時(shí)間。MPO染色檢測(cè)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),Real Time PCR檢測(cè)各組炎癥和纖維化相關(guān)指標(biāo)。Elisa檢測(cè)IL-1β和IL-6的蛋白水平,Masson染色檢測(cè)膠原含量,免疫組化染色檢測(cè)α-SMA表達(dá)。Western Blot檢測(cè)P38、AKT、GSK3β、STAT3等相關(guān)信號(hào)通路蛋白表達(dá)。此外,分離培養(yǎng)成年大鼠心肌成纖維細(xì)胞,給予IL-1β刺激或者秋水仙堿和IL-1β共同刺激后,采用Real Time PCR檢測(cè)各組細(xì)胞IL-6分泌情況,Western Blot檢測(cè)信號(hào)分子的表達(dá)。結(jié)果:與對(duì)照組相比,SP術(shù)后房顫誘發(fā)率和房顫持續(xù)時(shí)間明顯延長(zhǎng)。心房中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)明顯增加;心房組織中IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β在mRNA水平上表達(dá)上調(diào),而IL-1β和IL-6的蛋白表達(dá)也呈現(xiàn)時(shí)... 

【文章來(lái)源】：廈門大學(xué)福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１：秋水仙堿能夠濃度依賴的抑制ＳＰ大鼠房顫發(fā)生?Ａ、食道心房調(diào)博??技術(shù)記錄到的代表性正常大鼠體表心電圖（ＡＶＲ、ＩＩ）食道心電圖（Ｅｓｏ）代表??性圖片

癥反應(yīng)在房顫的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。為了進(jìn)一步探究秋水仙堿的具體機(jī)制，??我們檢測(cè)了?Ｓｈａｍ組、Ｖｅｈｉｃｌｅ組和Ｃｏｌｃｈ組大鼠心房組織中的炎癥反應(yīng)情況。如??圖２所示，Ａ圖為三組大鼠心房組織的典型的ＭＰＯ染色結(jié)果，Ｂ圖為ＭＰＯ染??色的統(tǒng)計(jì)結(jié)果，Ｖｅｈｉｃｌｅ組（７０８．０±４１．８）大鼠心房局部中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)顯著高于??Ｓｈａｍ組（１．２?±０．５），而與Ｖｅｈｉｃｌｅ組相比，Ｃｏｌｃｈ組中性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)降低了??５７．３％?（３０２．５±４１．８，?Ｐ０．００１），說(shuō)明秋水仙堿抑制了中性粒細(xì)胞在心房局部的??浸潤(rùn)。圖?Ｃ?為?Ｒｅａｌ?Ｔｉｍｅ?ＰＣＲ?結(jié)果，Ｖｅｈｉｃｌｅ?組心房?ＩＬ－ｌｐ、ＩＬ－６、ＴＮＦ－ａ、ＴＧＦ－Ｐ??表達(dá)較Ｓｈａｍ組顯著上調(diào)，而Ｃｏｌｃｈ組ＩＬ－６、ＴＮＦ－ａ、ＴＧＦ－ｐ明顯降低。其中對(duì)??ＩＬ－６的作用效果最為顯著，Ｖｅｈｉｃｌｅ組（１４．２±３．０）較Ｓｈａｍ組（２．２±１．１）增加了??７倍，而Ｃｏｌｃｈ組（３．９±１．６）較Ｖｅｈｉｃｌｅ組降低了?７２．５％。近年來(lái)相關(guān)臨床研究??結(jié)果顯示ＩＬ－６可以作為獨(dú)立預(yù)測(cè)房顫發(fā)生的危險(xiǎn)因子

為了進(jìn)一步研究秋水仙堿預(yù)防無(wú)菌性心包炎術(shù)后房顫發(fā)生的具體分子機(jī)制，??我們將Ｓｈａｍ組、Ｖｅｈｉｃｌｅ組和Ｃｏｌｃｈ組大鼠的心房組織提取全蛋白，采用Ｗｅｓｔｅｒｎ??Ｂｌｏｔ技術(shù)檢測(cè)心房局部相關(guān)信號(hào)分子的表達(dá)情況。如圖４所示，Ａ圖是依次是??ＳＴＡＴ３、Ｐ３８、ＧＳＫ３ｐ、ＡＫＴ、ＪＮＫ、ＥＲＫ?信號(hào)通路蛋白的典型?Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ?圖??片，Ｂ圖為其統(tǒng)計(jì)結(jié)果。與Ｓｈａｍ組相比，Ｖｅｈｉｃｌｅ組大鼠心房組織中Ｓｈａｍ組ＶＳ??Ｖｅｈｉｃｌｅ?組：Ｐ－ＳＴＡＴ３／ＳＴＡＴ３?（１．２７±０＿２１?ＶＳ?１０．３９±０．６９，?Ｐ＜０．００１）、??Ｐ－ＧＳＫ３ｐ／ＧＳＫ３ｐ?（０．７６＋０．１２?ＶＳ?１．４１＋０．１０，Ｐ＜０．０５）?．?Ｐ－Ｐ３８／Ｐ３８?（０．７０＋０．１５?ＶＳ??１．５４±０．２６，Ｐ＜０．０５）?Ｐ－ＡＫＴ／ＡＫＴ?（０．８２±０．１２?ＶＳ?１．５１?土０．１７，Ｐ＜０．０１）表達(dá)顯著增加，??而Ｃｏｌｃｈ組以上蛋白表達(dá)相應(yīng)降低，Ｖｅｈｉｃｌｅ組ＶＳ?Ｃｏｌｃｈ組：??Ｐ－ＳＴＡＴ３／ＳＴＡＴ３（１０．３９±０．６９?ＶＳ?２．９７±０．６６?Ｐ＜０．００１），?Ｐ－ＧＳＫ３ｐ／ＧＳＫ３ｐ（１．４１±０．１０??ＶＳ?０．４９＋０．０７；?Ｐ＜０．０１）＞Ｐ－Ｐ３８／Ｐ３８（１．５４±０．２６?ＶＳ?０．５５±０．０５；?Ｐ＜０．０５）＾?Ｐ－ＡＫＴ／ＡＫＴ??（１．５１±０．１７ＶＳ?０．８０５±０．１０２；?Ｐ＜０．０１）。而?Ｐ－ＪＮＫ／ＪＮＫ?和?Ｐ－ＥＲＫ／ＥＲＫ?表達(dá)量在??三組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]白介素-6及其受體與心血管系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J]. 劉曉柳,李光千.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2009(02)
[2]白介素1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究進(jìn)展[J]. 郭甫坤,吳曙光.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè)). 2001(01)



本文編號(hào)：3446592