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CPT誘導(dǎo)外周血破骨細(xì)胞凋亡作用及其分子機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-10-12 10:13
  目的:探討環(huán)化變構(gòu)腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(CPT)誘導(dǎo)外周血破骨細(xì)胞凋亡作用及其分子機(jī)制。方法:外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)經(jīng)巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)及可溶性核因子κB受體活化因子配體(sRANKL)誘導(dǎo)培養(yǎng)成熟破骨細(xì)胞,采用不同濃度的CPT誘導(dǎo)破骨細(xì)胞凋亡,應(yīng)用Annexin V-FITC熒光染色法檢測(cè)CPT誘導(dǎo)破骨細(xì)胞凋亡,RT-PCR檢測(cè)破骨細(xì)胞中CPT受體mRNA表達(dá)變化的影響。結(jié)果:PBMC在RANKL和M-CSF細(xì)胞因子誘導(dǎo)下培養(yǎng)21 d,均生成了具有骨吸收活性的破骨細(xì)胞。在2×106的接種密度下誘導(dǎo)產(chǎn)生破骨細(xì)胞的數(shù)量(細(xì)胞因子含量:30 ng/mL RANKL和30 ng/mL M-CSF)在5×105接種密度下(細(xì)胞因子含量:30 ng/mL RANKL和30 ng/mL M-CSF)的2倍。通過(guò)抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色后,不同濃度(0、100、500 ng/ml)CPT作用正常人的破骨細(xì)胞24 h和48 h后,出現(xiàn)明顯的細(xì)胞凋亡特征,Annexin V-FITC染色后,經(jīng)熒光顯微鏡觀察,0 ng/m... 

【文章來(lái)源】:臨床血液學(xué)雜志(輸血與檢驗(yàn)). 2019,32(12)

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 主要材料和試劑
    1.2 破骨細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定
    1.3 Annexin V-FITC熒光染色法檢測(cè)CPT誘導(dǎo)破骨細(xì)胞凋亡
    1.4 RT-PCR檢測(cè)破骨細(xì)胞在CPT處理前后相關(guān)受體mRNA的表達(dá)
    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 TRAP染色鑒定不同細(xì)胞密度對(duì)生成破骨細(xì)胞的影響
    2.2 CPT對(duì)破骨細(xì)胞凋亡的影響
    2.3 RT-PCR法檢測(cè)CPT相關(guān)受體DR4、DR5、DcR1及DcR2在破骨細(xì)胞上表達(dá)情況
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]藤黃酸聯(lián)合腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體誘導(dǎo)人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞凋亡的效果和機(jī)制[J]. 葉記林,吳愛(ài)蓮,王冬艷,彭建明,于有江,劉延慶.  中國(guó)癌癥雜志. 2018(04)

碩士論文
[1]CPT誘導(dǎo)人外周血源破骨細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制研究[D]. 馮玲玲.河北醫(yī)科大學(xué) 2016



本文編號(hào):3432381

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