目的:間充質(zhì)干細(xì)胞在細(xì)胞治療以及重建醫(yī)學(xué)中具有重要的意義。人脂肪組織來(lái)源的干細(xì)胞具有較低的供體發(fā)病率、良好的可塑性、產(chǎn)量高等特點(diǎn),使得它在骨重建過(guò)程中成為可靠的細(xì)胞種子來(lái)源。而提高脂肪干細(xì)胞的成骨分化能力能使得它更好地治療骨損傷。本研究利用干細(xì)胞因子處理脂肪干細(xì)胞并進(jìn)行相關(guān)的成骨機(jī)制方面的研究,探討了AKT/m TOR信號(hào)通路對(duì)脂肪干細(xì)胞成骨的調(diào)控作用。方法:（1）采用I型膠原酶消化法從脂肪組織中分離得到脂肪干細(xì)胞,利用油紅-O檢測(cè)其成脂能力以及利用茜素紅染色檢測(cè)其成骨能力,利用流式細(xì)胞術(shù)鑒定其表面標(biāo)記物;（2）利用干細(xì)胞因子處理脂肪干細(xì)胞,通過(guò)MTT檢測(cè)不同濃度的干細(xì)胞因子對(duì)脂肪干細(xì)胞的增殖影響作用。通過(guò)熒光定量PCR以及茜素紅染色、堿性磷酸酶染色檢測(cè)脂肪干細(xì)胞在不同時(shí)間段的成骨情況;（3）熒光定量PCR、茜素紅染色、堿性磷酸酶染色以及western blotting實(shí)驗(yàn)分析干細(xì)胞因子調(diào)控脂肪干細(xì)胞成骨的機(jī)制。結(jié)果:（1）從脂肪組織中提取的脂肪干細(xì)胞能夠進(jìn)行貼壁生長(zhǎng)、成脂成骨分化,細(xì)胞表面陽(yáng)性表達(dá)CD105,CD73和CD90,而不表達(dá)CD45,CD34,CD14和HLA-DR;（2... 

【文章來(lái)源】：暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
中英文縮略語(yǔ)表
第一章 前言
    1.1 脂肪干細(xì)胞概述
    1.2 脂肪干細(xì)胞的應(yīng)用
        1.2.1 脂肪干細(xì)胞在骨疾病方面的應(yīng)用
        1.2.2 脂肪干細(xì)胞在其它方面的應(yīng)用
    1.3 干細(xì)胞因子
        1.3.1 干細(xì)胞因子的生物學(xué)特征
        1.3.2 干細(xì)胞因子在骨疾病方面的應(yīng)用
    1.4 AKT/mTOR信號(hào)通路
    1.5 本研究的目的及意義
第二章 試驗(yàn)材料與方法
    2.1 材料與儀器
        2.1.1 細(xì)胞
        2.1.2 主要的儀器和設(shè)備
        2.1.3 試劑與耗材
    2.2 主要溶液配制
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 成骨誘導(dǎo)分化
        2.2.3 成脂誘導(dǎo)分化
        2.2.4 Western blotting
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 脂肪干細(xì)胞的分離提取流程
        2.3.2 ASCs的傳代
        2.3.3 ASCs的凍存
        2.3.4 SCF對(duì)ASCs的增殖測(cè)試（MTT法）
        2.3.5 ASCs成骨分化操作流程
        2.3.6 茜素紅染色
        2.3.7 堿性磷酸酶染色
        2.3.8 ASCs的成脂分化操作流程
        2.3.9 油紅-O染色
        2.3.10 實(shí)時(shí)熒光定量RT-qPCR法
        2.3.11 相關(guān)蛋白的檢測(cè)
        2.3.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
    3.1 提取與鑒定人脂肪組織中的脂肪干細(xì)胞（ASCs）
    3.2 干細(xì)胞因子（SCF）對(duì)ASCs的增殖、分化及干性的作用
    3.3 SCF對(duì)ASCs成骨分化的作用
        3.3.1 SCF對(duì)ASCs成骨分化的作用濃度
        3.3.2 SCF在ASCs成骨分化過(guò)程中的影響
    3.4 抑制AKT/mTOR信號(hào)通路能夠促進(jìn)SCF對(duì)ASCs成骨分化的作用
    3.5 討論
第四章 結(jié)論與展望
    4.1 全文總結(jié)
    4.2 創(chuàng)新之處
    4.3 展望
參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]TGF-β/BMP signaling and other molecular events: regulation of osteoblastogenesis and bone formation[J]. Md Shaifur Rahman,Naznin Akhtar,Hossen Mohammad Jamil,Rajat Suvra Banik,Sikder M Asaduzzaman.  Bone Research. 2015(01)
[2]干細(xì)胞因子促進(jìn)牙髓干細(xì)胞增殖與骨向分化能力[J]. 辛紅,陳潤(rùn)良,裴英波.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(14)



本文編號(hào)：3428808