目的 包裝含小鼠FcγRⅡB慢病毒表達(dá)載體,觀察其在小鼠B細(xì)胞表面的表達(dá)并研究其抑制性受體對MRL/lpr SLE小鼠的作用研究。方法 將慢病毒表達(dá)重組質(zhì)粒TRE-FcγRⅡB、慢病毒調(diào)節(jié)質(zhì)粒Tet分別與慢病毒包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞,分別包裝表達(dá)病毒和調(diào)節(jié)病毒,分別測定表達(dá)病毒和調(diào)節(jié)病毒感染滴度。將MRL/lpr SLE小鼠預(yù)防動物（周齡8周左右）40只隨機(jī)分成病毒液100ul組、病毒液200ul組、預(yù)防空病毒組（不含F(xiàn)cγRIIb基因）、預(yù)防對照組（生理鹽水組）四組,每組10只,再將模型動物（周齡16周左右）組40只隨機(jī)分成病毒100ul組、200ul組、治療空病毒組（不含F(xiàn)cγRIIb基因）和治療對照組（生理鹽水組）,每組10只。通過尾靜脈注射將病毒液轉(zhuǎn)導(dǎo)到MRL/lpr SLE小鼠體內(nèi),連續(xù)注射四周,每周一次。注射完成后,觀察二周后提尾反射法收集小鼠尿液檢測小鼠尿蛋白,眼眶內(nèi)眥靜脈取血約500μL后檢測小鼠抗核抗體和抗雙鏈DNA含量,取血完成后處死小鼠,取各組小鼠新鮮脾臟組織進(jìn)行研磨、淋巴細(xì)胞分離后再磁珠分選檢測B細(xì)胞上FcγRIIb基因的mRNA和蛋白的表達(dá)并做腎臟、... 

【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【圖文】：

重組質(zhì)粒鑒定圖

分別與 TRE 質(zhì)粒大小和 FcγRⅡB 基因片段大小一致（圖 2）。測序鑒示插入片段堿基序列與 GenBank 提供 FcγRⅡB 堿基序列同源性 100%

圖１：體外轉(zhuǎn)導(dǎo) B 細(xì)胞圖，（200×）LE 小鼠抗核抗體的變化 A、圖 C 與圖 D 相比抗核抗體含量明顯較減少，p<0.05,MRL/lpr SLE 小鼠抗核抗體的變化結(jié)果圖圖 C組抗核抗體含量，熒光數(shù) 3200的抗核抗體含量，熒光數(shù) 1400圖 C 治療對照組的抗核抗體含圖Ｄ治療病毒組的抗核抗體含


本文編號：3415066