編碼弓形蟲SAG1,GRA2,GRA7和ROP16中多表位的DNA疫苗及其對(duì)BALB/c小鼠的免疫保護(hù)性研究
發(fā)布時(shí)間:2021-08-17 05:42
研究背景:剛地弓形蟲是一種專性細(xì)胞內(nèi)寄生的機(jī)會(huì)性致病原蟲,可感染包含人類、牲畜、海洋哺乳動(dòng)物等在內(nèi)的大多數(shù)溫血?jiǎng)游?導(dǎo)致弓形蟲病的發(fā)生,嚴(yán)重影響公共健康。盡管在不同的國(guó)家和地區(qū),剛地弓形蟲的感染率是不同的,但弓形蟲病的流行呈上升趨勢(shì)。因此,研制能夠預(yù)防和控制弓形蟲病的有效疫苗迫在眉睫。研究目的:構(gòu)建弓形蟲多表位DNA疫苗及能表達(dá)細(xì)胞因子RANTES的重組載體作為疫苗佐劑,研究該多表位疫苗對(duì)感染急性弓形蟲病小鼠的免疫保護(hù)作用,評(píng)價(jià)RANTES基因佐劑對(duì)多表位DNA疫苗誘導(dǎo)小鼠免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)及加強(qiáng)作用。研究方法:首先利用生物信息學(xué)軟件和網(wǎng)絡(luò)在線預(yù)測(cè)工具預(yù)測(cè)弓形蟲SAG1,GRA2, GRA7和ROP16四種抗原的T細(xì)胞表位和B細(xì)胞表位,篩選出12個(gè)優(yōu)勢(shì)表位,經(jīng)人工合成編碼多表位的基因片段MEG (Multi-epitope Gene),利用分子生物學(xué)技術(shù)與方法,構(gòu)建了T-A克隆載體。經(jīng)過(guò)正確的鑒定,將回收純化的目的片段MEG亞克隆至表達(dá)載體pEGFP-C1中,構(gòu)建了重組表達(dá)質(zhì)粒pEGFP-TgMEG (pTgMEG)。利用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增小鼠脾臟內(nèi)活化T細(xì)胞表達(dá)與分泌調(diào)節(jié)因子RANTE...
【文章來(lái)源】:山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
符號(hào)說(shuō)明
前言
第一部分 弓形蟲多表位DNA疫苗及RANTES基因佐劑的構(gòu)建
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
第二部分 弓形蟲多表位DNA疫苗與RANTES基因佐劑的表達(dá)
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
第三部分 弓形蟲多表位DNA疫苗及基因佐劑RANTES免疫小鼠實(shí)驗(yàn)
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
附圖
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]疫苗佐劑最新研究進(jìn)展[J]. 周洋,耿興超,汪巨峰,李波. 中國(guó)新藥雜志. 2013(01)
[2]人畜共患寄生蟲病的研究進(jìn)展[J]. 張漫,李志榮,王輝. 中國(guó)豬業(yè). 2012(11)
[3]多CTL表位DNA疫苗誘導(dǎo)特異性CTL應(yīng)答的研究[J]. 史霖,袁育康,勝利,范桂香. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2006(04)
[4]趨化因子基因?qū)IV-1外膜蛋白基因疫苗誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答的影響[J]. 王福祥,潘艷,孫永濤. 中國(guó)病毒學(xué). 2005(06)
[5]SAPGTP和PG為接頭的5’IL6-TNFα衍生物融合蛋白[J]. 劉麗,徐琪,胡曉冥,劉立忠,王穎,謝寶樹,冷愛(ài)軍. 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 1999(04)
本文編號(hào):3347177
【文章來(lái)源】:山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
符號(hào)說(shuō)明
前言
第一部分 弓形蟲多表位DNA疫苗及RANTES基因佐劑的構(gòu)建
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
第二部分 弓形蟲多表位DNA疫苗與RANTES基因佐劑的表達(dá)
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
第三部分 弓形蟲多表位DNA疫苗及基因佐劑RANTES免疫小鼠實(shí)驗(yàn)
一、材料
二、方法
三、結(jié)果
四、討論
附圖
參考文獻(xiàn)
致謝
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【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]疫苗佐劑最新研究進(jìn)展[J]. 周洋,耿興超,汪巨峰,李波. 中國(guó)新藥雜志. 2013(01)
[2]人畜共患寄生蟲病的研究進(jìn)展[J]. 張漫,李志榮,王輝. 中國(guó)豬業(yè). 2012(11)
[3]多CTL表位DNA疫苗誘導(dǎo)特異性CTL應(yīng)答的研究[J]. 史霖,袁育康,勝利,范桂香. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2006(04)
[4]趨化因子基因?qū)IV-1外膜蛋白基因疫苗誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答的影響[J]. 王福祥,潘艷,孫永濤. 中國(guó)病毒學(xué). 2005(06)
[5]SAPGTP和PG為接頭的5’IL6-TNFα衍生物融合蛋白[J]. 劉麗,徐琪,胡曉冥,劉立忠,王穎,謝寶樹,冷愛(ài)軍. 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 1999(04)
本文編號(hào):3347177
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