前列腺腫瘤（Prostate tumor）作為一種常見的男性腫瘤疾病,主要發(fā)病于老年男性群體。近年來,由于前列腺腫瘤在中國男性群體中發(fā)生率和死亡率呈現(xiàn)明顯升高的趨勢,因而找到相應(yīng)的靶向標(biāo)志物用于前列腺腫瘤早期診斷刻不容緩。前列腺作為男性生殖系統(tǒng)中主要的分泌腺,對男性的生殖健康發(fā)揮著重要的生理作用。前列腺腫瘤是一種老年易發(fā)性疾病,具有潛伏期長、早期癥狀不明顯、發(fā)病率高以及缺乏有效的早期診斷標(biāo)記物等特點(diǎn),因而不易早期診斷和提前防治。早在上世紀(jì)美國、英國等西方國家就已經(jīng)針對于前列腺相關(guān)疾病開展了一系列研究工作,旨在找到相應(yīng)研究技術(shù)解決這一難題。我國早期由于醫(yī)療水平有限,對前列腺相關(guān)疾病沒有高度重視。然而隨著我國人口老齡化進(jìn)程的發(fā)展以及前列腺腫瘤致死率的逐漸升高,引起了人們對前列腺相關(guān)疾病的高度重視。但該疾病往往早期癥狀不易察覺,發(fā)現(xiàn)時已是腫瘤晚期,因而找出相應(yīng)蛋白用于早期檢測前列腺相關(guān)疾病顯得尤為重要。近來研究表明前列腺腫瘤的發(fā)生與鈣相關(guān)蛋白之間存在一定的相關(guān)性,而鈣離子主要是通過細(xì)胞膜上的鈣通道蛋白進(jìn)入細(xì)胞,從而維持細(xì)胞內(nèi)的鈣穩(wěn)態(tài)。鈣穩(wěn)態(tài)失衡,如鈣內(nèi)流增多使得胞漿中鈣離子的濃度升高,促進(jìn)腫... 

【文章來源】：陜西師范大學(xué)陜西省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【圖文】：

圖３－３腫瘤小鼠、９８５小鼠和野生型小鼠前列腺組織的ＲＮＡ瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果??．－

分別提取不同時期ＸＨ９８５－ＪＸ９１前列腺腫瘤模型小鼠、ＸＨ９８５非腫瘤小鼠和??ＷＴ小鼠總ＲＮＡ，用１．５％瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測，可以看到：２８Ｓ、１８Ｓ和５Ｓ??共三條亮帶，從圖３－３可以看到２８Ｓ條帶的亮度約為１８Ｓ的兩倍。使用微量快速??核酸定量儀對提取的ＲＮＡ進(jìn)行純度和濃度進(jìn)行測定，ＯＤ２６０／２８０的比值位于??１．８－２．０之間。從以上兩點(diǎn)推斷出提取的ＲＮＡ質(zhì)量較好，可以用于實(shí)時定量ＰＣＲ實(shí)??驗(yàn)（論３?）。??１ＢＳＳ??５Ｓ??１２３４５６７８９??圖３－３腫瘤小鼠、９８５小鼠和野生型小鼠前列腺組織的ＲＮＡ瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果??Ｆｉｇ．?３－３?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｔｉｓｓｕｅ?ｉｎ?ｔｕｍｏｒ?ｍｉｃｅ，?９８５?ｍｉｃｅ?ａｎｄ?ｗｉｌｄ?ｔｙｐｅ??ｍｉｃｅ??１號是前列腺腫瘤早期，２號是前列腺腫瘤中期，３號是前列腺腫瘤晚期，４號是９８５青年小鼠??前列腺組織，５號是９８５中年小鼠前列腺組織，６號是９８５老年小鼠前列腺組織，７號是ＷＴ??青年小鼠前列腺組織，８號是ＷＴ中年小鼠前列腺組織，９號是ＷＴ老年小鼠前列腺組織。??Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＲＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｔｒａｉｎｓ?ｏｆ?ｍｉｃｅ?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｔａｇｅｓ．?１?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ?ｔｈｅ??ｅａｒｌｙ?ｓｔａｇｅ?ｏｆ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｔｕｍｏｒｓ

圖３－５ｑＰＣＲ溶解曲線??Ｆｉｇ．?３－５?Ｔｈｅ?ｍｅｌｔ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｑＰＣＲ??從圖３－５溶解曲線可以看出，利用ＳＹＢＲ進(jìn)行ｑＰＣＲ檢測Ｃ４ＭＡ－／Ｔ在基因水??平上表達(dá)量，從圖中可以看出只有一個峰，對應(yīng)一種產(chǎn)物，對應(yīng)的峰的位置是退??火溫度的位置，即發(fā)出熒光的片段是我們需要的產(chǎn)物。??將不同等級前列腺腫瘤小鼠和不同年齡非腫瘤小鼠熒光強(qiáng)度值導(dǎo)出，通過與??對照組相比較，推斷在不同品系小鼠中的表達(dá)情況。??統(tǒng)計(jì)目的基因以及內(nèi)參基因ＧＡＤＰＨ在各個樣品中的Ｃｔ值，運(yùn)用??公式Ｆ＝（ｌ＋Ｅｍ）ａＭ２＿ｅｔＭ１／（ｌ＋Ｅｎ）ｅｔＮ２＿ＱＮ１計(jì)算出Ｇ４ＭＡ－／Ｔ在基因水平上的表達(dá)情況。??結(jié)果如表３－１所呈現(xiàn)：??表３－１是實(shí)時熒光定量ＰＣＲ計(jì)算結(jié)果??Ｔａｂｌｅ３－１?Ｒｅｓｕｌｔ?ｏｆ?Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ?Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ??不同品系小鼠?ＥＳ?ＭＳ?ＡＳ?９８５?Ｙ?９８５?Ｍ?９８５?０?ＷＴＹ?ＷＴＭ?ＷＴＯ??計(jì)算結(jié)果?〇．５８?０．８９?０．２８?１．１９?０．０７?０．１４?１．００?０．４７?１．１９??計(jì)算結(jié)果?１．４９?０．８３?０．３２?１．４９?０．６１?０．５３?１．００?０．７４?１．１８??計(jì)算結(jié)果?０．９３?１．３９?０．４８?１．２１?０．２４?１．２０?１．００?０．５０?０．６４??注：ＥＳ：?Ｅａｒｌｙ?Ｓｔａｇｅ

【參考文獻(xiàn)】：
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