發(fā)布時(shí)間：2021-07-27 09:29

　　漢坦病毒（Hantavirus）可引起兩種急性病毒性傳染�。阂环N是漢坦病毒肺綜合征（Hantavirus pulmonary syndrome，HPS），另一種是腎綜合征出血熱（hemorrhagicfever with renal syndrome, HFRS）。其中，HFRS在我國(guó)流行范圍廣，發(fā)病率高，病死率也較高；另外，HFRS的傳染源和宿主動(dòng)物廣泛，可通過(guò)多種途徑傳播，其防治任務(wù)十分艱巨。但由于HFRS的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，有些環(huán)節(jié)尚未研究清楚，使臨床缺乏特效治療藥物，目前使用的滅活疫苗也存在不足，因此加強(qiáng)漢坦病毒相關(guān)的基礎(chǔ)研究十分必要。漢坦病毒包膜糖蛋白（Glycoprotein，GP）能誘導(dǎo)病毒與宿主細(xì)胞發(fā)生膜融合，能刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體，對(duì)感染動(dòng)物或HFRS患者有一定的保護(hù)作用，與病毒的致病性及誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生抗病毒免疫等均有密切關(guān)系，是漢坦病毒研究中最受關(guān)注的蛋白之一。漢坦病毒Gn、Gc上均存在保守的N-糖基化位點(diǎn)。國(guó)內(nèi)外對(duì)一些病毒的研究表明，N-糖基化對(duì)糖蛋白自身的轉(zhuǎn)運(yùn)、折疊，對(duì)抗原決定簇的結(jié)構(gòu)、功能以及對(duì)病毒顆粒的成熟、毒力和免疫逃避等均有重要作用。但目前對(duì)漢坦病毒GP糖... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：109 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略語(yǔ)表
中文摘要
Abstract
前言
文獻(xiàn)回顧
    一、漢坦病毒包膜糖蛋白研究進(jìn)展
        1.漢坦病毒的分類(lèi)及基因組結(jié)構(gòu)
        2.漢坦病毒顆粒及其組成
        3.漢坦病毒 GP 的分子生物學(xué)特性
    二、N-糖基化對(duì)病毒包膜糖蛋白功能影響的研究進(jìn)展
        1.糖基化對(duì)相關(guān)病毒包膜糖蛋白結(jié)構(gòu)與功能的影響
        2.糖基化對(duì)漢坦病毒包膜糖蛋白結(jié)構(gòu)與功能的影響
        3.病毒包膜糖蛋白糖基化與蛋白功能研究的常用方法
    三、假病毒的研究進(jìn)展
        1.假病毒在體內(nèi)定向傳遞基因的應(yīng)用研究
        2.假病毒在病毒受體及穿入過(guò)程研究中的應(yīng)用
        3.假病毒在中和抗體研究中的應(yīng)用
    四、慢病毒載體的研究進(jìn)展
        1.慢病毒載體的分子改造
        2.慢病毒載體的安全性
        3.慢病毒載體的應(yīng)用
    五、凝集素芯片技術(shù)在糖組學(xué)分析研究中的應(yīng)用進(jìn)展
        1. 凝集素芯片的基本原理
        2. 用于糖鏈分析的主要凝集素
        3. 凝集素芯片在糖組學(xué)研究中的應(yīng)用
第一部分 含漢灘病毒M 基因或其糖基化位點(diǎn)突變基因重組假病毒的構(gòu)建及其糖鏈結(jié)構(gòu)的比較研究
    1 材料
        1.1 細(xì)菌及載體
        1.2 凝集素芯片
        1.3 細(xì)胞
        1.4 工具酶
        1.5 主要試劑
        1.6 培養(yǎng)基
        1.7 常用緩沖液系統(tǒng)
        1.8 主要儀器和器材
    2 方法
        2.1 HTNV Gn、Gc 編碼基因即 M 片段的獲得
        2.2 HTNV Gn、Gc 編碼基因糖基化位點(diǎn)的突變
        2.3 含 HTNV M 基因或其糖基化位點(diǎn)突變基因表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定
        2.4 含 HTNV M 基因或其糖基化位點(diǎn)突變基因重組假病毒的包裝
        2.5 重組假病毒的滴度測(cè)定
        2.6 重組假病毒糖鏈結(jié)構(gòu)的檢測(cè)
        2.7 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析
    3 結(jié)果
        3.1 HTNV Gn、Gc 編碼基因即 M 片段的獲得
        3.2 HTNV Gn、Gc 糖基化位點(diǎn)的突變
        3.3 含 HTNV M 基因或其糖基化位點(diǎn)突變基因表達(dá)載體的鑒定結(jié)果
        3.4 含 HTNV M 基因或其糖基化位點(diǎn)突變基因重組假病毒的包裝
        3.5 重組假病毒的滴度測(cè)定結(jié)果
        3.6 重組假病毒的蛋白定量結(jié)果
        3.7 重組假病毒的凝集素芯片檢測(cè)結(jié)果
    4 討論
        4.1 含漢灘病毒 M 基因或其糖基化位點(diǎn)突變基因的重組假病毒的包裝
        4.2 含漢灘病毒 M 基因或其糖基化位點(diǎn)突變基因的重組假病毒糖鏈結(jié)構(gòu)的比較
第二部分 含漢灘病毒 M 基因或其糖基化位點(diǎn)突變基因的重組假病毒感染性及免疫學(xué)特性比較研究
    1 材料
        1.1 細(xì)胞
        1.2 病毒
        1.3 動(dòng)物
        1.4 抗體及主要試劑
        1.5 培養(yǎng)基
        1.6 主要儀器和器材
        1.7 其他常用試劑、緩沖液
    2 方法
        2.1 含 HTNV M 基因或其糖基化位點(diǎn)突變基因重組假病毒感染活性的比較
        2.2 免疫動(dòng)物
        2.3 免疫小鼠血清中特異性抗體的檢測(cè)
        2.4 微量細(xì)胞培養(yǎng)中和試驗(yàn)檢測(cè)免疫小鼠血清中和抗體
        2.5 免疫小鼠細(xì)胞因子的檢測(cè)
        2.6 重組假病毒免疫動(dòng)物保護(hù)試驗(yàn)
        2.7 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析
    3 結(jié)果
        3.1 含 HTNV M 基因或其糖基化位點(diǎn)突變基因重組假病毒感染活性的比較結(jié)果
        3.2 免疫小鼠血清中特異性抗體的檢測(cè)結(jié)果
        3.3 免疫小鼠血清中和抗體的檢測(cè)結(jié)果
        3.4 免疫小鼠細(xì)胞因子的檢測(cè)結(jié)果
        3.5 重組假病毒免疫動(dòng)物保護(hù)試驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
        4.1 含漢灘病毒 M 基因或其糖基化位點(diǎn)突變基因的重組假病毒感染性的比較
        4.2 含漢灘病毒 M 基因或其糖基化位點(diǎn)突變基因的重組假病毒免疫原性的比較
        4.3 重組假病毒免疫對(duì) HTNV 感染小鼠的保護(hù)作用
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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