[目的]旨在討論腸上皮細(xì)胞（Intestinal Epithelial Cells-6,IEC-6）在誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs）分化過(guò)程中的機(jī)制,為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分化機(jī)制提供參考。[方法]1.用全骨髓貼壁培養(yǎng)法從大鼠股骨和脛骨中提取骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞并培養(yǎng),從細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞表面抗原、細(xì)胞成脂誘導(dǎo)方面對(duì)其進(jìn)行鑒定。2.實(shí)驗(yàn)分組為實(shí)驗(yàn)共培養(yǎng)組BMSCs+IEC-6和空白對(duì)照組BMSCs+BMSCs。將IEC-6和BMSCs分別置于Transwell上、下室中共同培養(yǎng)3、7、10天,誘導(dǎo)BMSCs的分化,后用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)CK、Villin的表達(dá)情況。3.實(shí)驗(yàn)分組為實(shí)驗(yàn)共培養(yǎng)組BMSCs+IEC-6、實(shí)驗(yàn)抑制組BMSCs+IEC-6+U0126 和空白對(duì)照組 BMSCs+BMSCs。用 Transwell 共同培養(yǎng) 36h和72h,用Western Blot的方法檢測(cè)ERK1/2通路相關(guān)蛋白p-ERK1/2和p-MEK1/2的表達(dá)情況。[結(jié)果]1.用全骨髓貼壁培養(yǎng)法分離獲取的BMSCs,呈長(zhǎng)梭形生長(zhǎng),放射狀排列... 

【文章來(lái)源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．３?Ｐ０代干細(xì)胞第六天（４０?Ｘ?）?圖１．４Ｐ０代干細(xì)胞第九天（４０Ｘ?）??

形態(tài)更加細(xì)長(zhǎng)，增值速度明顯快于原代，生長(zhǎng)４－－５天后細(xì)胞融合率達(dá)８０％－－９０°／〇，??可以傳至第２代。Ｐ２代細(xì)胞增殖速度更快，生長(zhǎng)更旺盛，排列整齊規(guī)則，統(tǒng)一??呈長(zhǎng)梭形。如圖１．１－１．４：??■?■??圖Ｕ?Ｐ０代干細(xì)胞第一天（４０Ｘ?）?圖１．２?Ｈ）代干細(xì)胞第四天（４０Ｘ?）??ｍｍ??圖１．３?Ｐ０代干細(xì)胞第六天（４０?Ｘ?）?圖１．４Ｐ０代干細(xì)胞第九天（４０Ｘ?）??圖隨著培養(yǎng)時(shí)間增長(zhǎng)，細(xì)胞由原來(lái)的零散分布變?yōu)榇貭罘植�，�?xì)胞集落擴(kuò)大??增多，并開(kāi)始互相融合，細(xì)胞形態(tài)也逐漸統(tǒng)一，呈長(zhǎng)梭形。??２．２骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞活力測(cè)定??細(xì)胞活力約為９７．３％，細(xì)胞活力好，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。??表１．１細(xì)胞活力鑒定??上室?下室??左上?右上?左下?右下?左上?右上?左下?右下?百分比??藍(lán)染?１０?１?０?１１０?１?３．５％??拒染?１９?１５?１５?１８?１６?１８?２０?１８?９６．５％??表１．１拒染細(xì)胞百分率即為細(xì)胞活力，為９８．３２％，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。??２．３骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表面抗原的測(cè)定??采用細(xì)胞形態(tài)均一，生長(zhǎng)狀態(tài)佳的第３代ＢＭＳＣｓ進(jìn)行檢測(cè)。細(xì)胞經(jīng)流式細(xì)??１４??

圓圓??圖１．７誘導(dǎo)組ＢＭＳＣｓ染色前（１００Ｘ）?圖１．８誘導(dǎo)組ＢＭＳＣｓ染色后（１００Ｘ）??二遺？＇＇?：絮Ｐ??ＳｉＳｉｌｌ??ＨＨ??圖１．９對(duì)照組ＢＭＳＣｓ染色前（１００Ｘ）?圖１．１０對(duì)照組ＢＭＳＣｓ染色后（１００Ｘ）??圖１．７－－１．１０：誘導(dǎo)組經(jīng)油紅Ｏ染色后，可見(jiàn)圓形脂滴細(xì)胞被染成紅色，而空白對(duì)照??組染色前后無(wú)變化，仍為長(zhǎng)梭形，且不能被油紅０染色。??３討論??間充質(zhì)干細(xì)胞（ＭＳＣｓ）是來(lái)源于中胚層的多能干細(xì)胞，具有干細(xì)胞所特有??的自我更新復(fù)制、增殖和分化的潛能，能夠增殖分化為與其自身性質(zhì)完全相同的??細(xì)胞，同時(shí)也可以在特定條件下分化為其他胚層的細(xì)胞［１］，如中胚層的骨細(xì)胞［２］、??軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞【３］，內(nèi)胚層的肌細(xì)胞［３］、腸上皮細(xì)胞、肺細(xì)胞及為外胚層的??上皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞［４］等。ＭＳＣｓ廣泛存在于牙髓、脂肪組織、臍帶靜脈血、皮??膚組織、肌肉等組織和器官［５＿＼但最主要的來(lái)源為脂肪組織和骨髓［６］，也是科??研實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用最廣泛的細(xì)胞

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)急性肝衰竭大鼠腸道屏障保護(hù)作用的研究[D]. 楊波.昆明醫(yī)科大學(xué) 2014



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