目的探討經(jīng)靜脈回輸用Edu標記的自身骨髓間充質(zhì)干細胞能否擴增分化成為肺組織中的氣道上皮細胞、血管內(nèi)皮細胞等,修復受損的肺組織,重建肺功能。方法1.選健康雄性新西蘭大白兔2.7³.5kg、32只,分成27只造模組和5只健康對照組。采用胰蛋白酶（2.5g/100ml 0.9%Nacl）霧化方法構建肺氣腫模型,每周霧化一次,連續(xù)霧化4周后繼續(xù)常規(guī)飼養(yǎng)12周。造模結束后,通過肺雙源CT計算平均肺容積,對比造模前、開始造模后8周、16周平均肺容積變化;采用對比造模組與健康組肺組織大體標本、HE病理變化來驗證肺氣腫模型的建立。2.隨機抽取18只模型兔隨機分成6組,每組3只。分別為:模型對照組、抗氧化組、低劑量干細胞治療組、低劑量干細胞聯(lián)合抗氧化治療組、高劑量干細胞治療組、高劑量干細胞聯(lián)合抗氧化治療組;選取擬定行干細胞治療的12只模型兔,在脛骨處各抽取0.5ml骨髓液（每只兔子骨髓液進行編號標記,以便分別培養(yǎng)、擴增、Edu染色,然后自身回輸）,采用骨髓貼壁法培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細胞。當骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)至第三代時,將骨髓間充質(zhì)干細胞與10u M Edu共孵育48小時,抽取100u... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學福建省

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

新西蘭大白兔正常肺組織大體標本：顏色為均一褐紅色，肺組織結構完整；

1. 實驗動物一般情況造模前：各實驗動物精神良好，毛發(fā)光亮、潔白（舔毛習慣），飲食正常。造模階段中：各實驗兔精神萎靡，毛發(fā)發(fā)黃、枯燥、結塊（舔毛習慣發(fā)生改變），在第二次霧化結束后 2-3 天，大多數(shù)（17/27）模型兔出現(xiàn)流鼻清涕，甚至濃鼻涕。在第三、四霧化結束后，出現(xiàn) 5 只模型兔死亡。在完成 4 次豬胰蛋白酶霧化后，大多數(shù)（15/22）模型兔食量約減少造模前 1/3。2. 肺氣腫模型鑒定2.1．病理大體標本（1）.新西蘭大白兔正常肺組織大體標本：可見均一褐紅色，肺組織結構完整，未有異常結構出現(xiàn)；（2）.豬胰蛋白酶霧化建模后肺組織大體標本：在兩肺葉表面可見數(shù)枚透亮肺泡，大小不等；同時可見雙肺上葉顏色灰白，肺葉密度稀疏，病變嚴重者蔓延范圍更廣（詳見圖 2.1、圖 2.2）。圖 2.1:新西蘭大白兔正常肺組織大體標本 圖 2.2：新西蘭大白兔造模后大體標本

圖 2.5 模型組（10X20） 圖 2.6 正常組（10X20）圖 2.3：模型對照組肺 HE 染色鏡下觀可見左上方出現(xiàn)大量炎性細胞浸潤，肺組織結構輪廓糊不清；右下方肺組織結構相對完整，出現(xiàn)少量炎性細胞浸潤；中間可見肺大泡結構形成（1倍鏡下觀）；圖 2.4：正常組肺 HE 染色鏡下觀可見肺組織結構輪廓清晰，未見炎性細胞浸潤（1

【參考文獻】：
期刊論文
[1]缺氧環(huán)境下白細胞介素8通過Akt-STAT3通路提高骨髓間充質(zhì)干細胞自噬和增殖能力[J]. 沈雷,張善強,張曉東,張彧婷,謝立平,姜楊,馬勇,李國峰.  生物工程學報. 2016(10)
[2]丹參注射液對實驗性兔肺氣腫阻抑作用的研究[J]. 郭蘭萍,王志剛,梁標,吳斌,周愛蓮,彭勃.  中國中藥雜志. 2005(15)



本文編號：3264310