目的:觀察銅綠假單胞菌外膜囊泡（OMVs）對(duì)肺上皮細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響。方法:培養(yǎng)肺上皮細(xì)胞BEAS–2B,采用1、10和30μg·mL-1濃度OMVs刺激12、16或24 h,實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)腫瘤壞死因子（TNF–α）和白細(xì)胞介素8（IL–8）和mRNA表達(dá)。ELISA檢測(cè)培養(yǎng)上清TNF–α和IL–8分泌的變化;提取核蛋白,采用ELISA測(cè)定OMVs處理前后核因子κB（NF–κB）活性,并采用NF–κB抑制劑處理細(xì)胞,觀察對(duì)OMVs誘導(dǎo)TNF–α和IL–8分泌的影響。結(jié)果:采用1μg·mL^-1、10μg·mL^-1和30μg·mL^-1 OMVs處理BEAS–2B細(xì)胞12 h后,TNF–α和IL–8的mRNA水平均高于陰性對(duì)照組,呈一定的劑量依賴(lài)性。30μg·mL^-1 OMVs作用細(xì)胞4 h后即可上調(diào)TNF–α和IL–8 mRNA表達(dá),并持續(xù)至16 h。30μg·mL^-1 OMVs處理細(xì)胞后,NF–κB的活性明顯增強(qiáng),NF–κ... 

【文章來(lái)源】：深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2019,29(22)

【文章頁(yè)數(shù)】：2 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    1.2 銅綠假單胞菌培養(yǎng)與OMVs提取
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
    1.4 ELISA檢測(cè)TNF–α和IL–8分泌
    1.5 實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)mRNA表達(dá)
    1.6 NF–κB活性測(cè)定
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 OMVs以劑量依賴(lài)性方式誘導(dǎo)BEAS–2B細(xì)胞表達(dá)TNF–α和IL–8 mRNA
    2.2 OMVs誘導(dǎo)BEAS–2B細(xì)胞分泌TNF–α和IL–8
    2.3 OMVs經(jīng)NF–κB誘導(dǎo)BEAS–2B細(xì)胞分泌TNF–α和IL–8
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