目的:觀察銅綠假單胞菌外膜囊泡（OMVs）對肺上皮細胞分泌細胞因子的影響。方法:培養(yǎng)肺上皮細胞BEAS–2B,采用1、10和30μg·mL-1濃度OMVs刺激12、16或24 h,實時定量聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）和酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測腫瘤壞死因子（TNF–α）和白細胞介素8（IL–8）和mRNA表達。ELISA檢測培養(yǎng)上清TNF–α和IL–8分泌的變化;提取核蛋白,采用ELISA測定OMVs處理前后核因子κB（NF–κB）活性,并采用NF–κB抑制劑處理細胞,觀察對OMVs誘導(dǎo)TNF–α和IL–8分泌的影響。結(jié)果:采用1μg·mL^-1、10μg·mL^-1和30μg·mL^-1 OMVs處理BEAS–2B細胞12 h后,TNF–α和IL–8的mRNA水平均高于陰性對照組,呈一定的劑量依賴性。30μg·mL^-1 OMVs作用細胞4 h后即可上調(diào)TNF–α和IL–8 mRNA表達,并持續(xù)至16 h。30μg·mL^-1 OMVs處理細胞后,NF–κB的活性明顯增強,NF–κ... 

【文章來源】：深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2019,29(22)

【文章頁數(shù)】：2 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要實驗試劑
    1.2 銅綠假單胞菌培養(yǎng)與OMVs提取
    1.3 細胞培養(yǎng)與處理
    1.4 ELISA檢測TNF–α和IL–8分泌
    1.5 實時定量PCR檢測mRNA表達
    1.6 NF–κB活性測定
    1.7 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 OMVs以劑量依賴性方式誘導(dǎo)BEAS–2B細胞表達TNF–α和IL–8 mRNA
    2.2 OMVs誘導(dǎo)BEAS–2B細胞分泌TNF–α和IL–8
    2.3 OMVs經(jīng)NF–κB誘導(dǎo)BEAS–2B細胞分泌TNF–α和IL–8
3 討論



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