目的1.建立軍團(tuán)菌感染的小鼠模型，探討TLR4與軍團(tuán)菌感染的關(guān)系。2.通過比較TLR4蛋白及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)，初步闡明TLR4在軍團(tuán)菌感染中的作用機(jī)制。方法1. TLR4基因突變型小鼠C3H/HeJ小鼠、C3H/HeN小鼠作為實(shí)驗(yàn)動物，6-8周，每組8只，雌雄各半。設(shè)立C3H/HeJ染菌組、C3H/HeN染菌組、C3H/HeN對照組三個(gè)實(shí)驗(yàn)組。C3H/HeN對照組作為C3H/HeJ染菌組、C3H/HeN染菌組的共同對照組。染菌組氣管注射50ul1.2×10⁷cfu/ml軍團(tuán)菌菌懸液，對照組氣管注射50ul無菌生理鹽水，分別于染菌后12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)處死小鼠。2.處死小鼠前采集眼眶血約2ml,用流式細(xì)胞術(shù)檢測各組PBMC TLR4蛋白的表達(dá)量，分析三組各時(shí)間點(diǎn)TLR4蛋白表達(dá)水平的變化。處死小鼠后，取染菌組和對照組的小鼠每個(gè)時(shí)間點(diǎn)左肺上葉約0.02g固定做病理切片;3.將剩余肺組織勻漿，用酶聯(lián)免疫吸附法檢測各組肺組織中TNF-α和IL-1β的含量。結(jié)果①C3H/HeJ小鼠和C3H/HeN小鼠進(jìn)行生存實(shí)驗(yàn)時(shí)，C3H/HeJ小鼠的病... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組肺組織C3H/HeN對照組400×

圖6三組肺組織TNF-α水平邊際均數(shù)圖3.2 IL-1β與軍團(tuán)菌感染的關(guān)系3.2.1繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線以試劑盒推薦的濃度配制標(biāo)準(zhǔn)品濃度，在酶標(biāo)儀 450nm 處測量 OD 值，以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在 Excel 表格中繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。見表3-3 和圖 7。表3-3 IL-1β標(biāo)準(zhǔn)品濃度（pg/ml）和OD值標(biāo)準(zhǔn)品 1 2 3 4 5 6 7 8濃度 0 15.625 31.25 62.5 125 250 500 1000OD 值 0.138 0.199 0.165 0.206 0.250 0.294 0.636 1.141

臟臟器系數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=3.765,P=0.028），各個(gè)時(shí)間點(diǎn)之間差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=2.296,P=0.084），分組和時(shí)間點(diǎn)之間交互作用差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=3.509,P=0.004）。經(jīng) LSD 法兩兩比較，CH/HeJ 染菌組、C3H/HeN 染菌組與 C3H/HeN 對照組間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，C3H/HeJ 染菌組和 C3H/HeN 染菌組的臟器系數(shù)均高于 C3H/HeN 對照組。見表 1-2。肺臟臟器系數(shù)邊際均數(shù)圖見圖2。表1-2三組肺臟臟器系數(shù)時(shí)間點(diǎn) C3H/HeJ 染菌組( x s)C3H/HeN 染菌組( x s)C3H/HeN 對照組( x s)12 小時(shí) 0.0068±0.0008 0.0088±0.0023 0.0079±0.001924 小時(shí) 0.0078±0.0014 0.0076±0.0006 0.0063±0.000748 小時(shí) 0.0078±0.0009 0.0064±0.0007 0.0066±0.001272 小時(shí) 0.0079±0.0007 0.0075±0.0009 0.0066±0.0013

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