發(fā)布時(shí)間：2021-05-23 10:54

　　手足口�。℉and,foot and mouth disease, HFMD）是一種嬰幼兒易感的病毒性傳染病,世界大部分國家和地區(qū)均有流行。近些年,出現(xiàn)在亞太地區(qū)的手足口病的大規(guī)模爆發(fā)引起高的發(fā)病率與死亡率,手足口病已成為亞太地區(qū)嚴(yán)重的公共健康問題之一。引起HFMD的病原體為腸道病毒,最常見的是腸道病毒71型（Enterovirus 71, EV71）和柯薩奇病毒A16型（Coxsackievirus A16, CVA16）,CVA16的臨床癥狀較溫和,由該病毒感染引起的病例數(shù)量常超過總感染人數(shù)的60%以上。EV71則易引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病包括病毒性腦膜炎,腦炎,類似小兒麻痹的癱瘓、肺水腫和心肌炎等并發(fā)癥,經(jīng)常導(dǎo)致嬰幼兒的死亡。在手足口病的治療方面,目前臨床上使用廣譜的抗病毒藥物,但效果不佳。在預(yù)防方面,我國大陸已有3家公司的EV71滅活疫苗已進(jìn)入Ⅲ臨床,均呈現(xiàn)良好的體內(nèi)保護(hù)效果,但仍未上市使用。然而人們對(duì)EV71/CVA16的抗原特性所知尚淺,深入的研究勢(shì)在必行。揭示EV71/CVA16的抗原性和表位特征,尤其是中和表位的鑒定對(duì)疫苗設(shè)計(jì)至關(guān)重要。目前有多篇文獻(xiàn)報(bào)道了EV71的B細(xì)胞表... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1. 手足口病簡(jiǎn)介
        1.1 手足口病的臨床癥狀
        1.2 EV71和CVA16的病原學(xué)
        1.3 手足口病的臨床和分子流行病學(xué)
        1.4 手足口病的治療與預(yù)防
    2. 特異性抗原表位的篩選
        2.1 抗原表位的篩選方式
        2.2 抗原表位的呈遞載體
    3. 本文立題依據(jù)與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞系及病毒
        2.1.2 短肽及滅活、VLPs蛋白
        2.1.3 質(zhì)粒、菌種和細(xì)胞
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.5 主要儀器
        2.1.6 常用試劑
        2.1.7 主要溶劑配制
        2.1.8 相關(guān)引物的設(shè)計(jì)和合成
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 表位的選擇
        2.2.2 pET28a-PP-EV71和pET28a-PP-CVA16嵌合質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.2.3 pET28a-PP-EV71和pET28a-PP-CVA16嵌合蛋白表達(dá)及純化
        2.2.4 目的蛋白的鑒定
        2.2.5 免疫實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 免疫評(píng)價(jià)
        2.2.7 蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)
        2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
    3.1 嵌合質(zhì)粒pET28a(+)-PP-epitope的構(gòu)建
    3.2 PP-epitope嵌合蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)及純化
    3.3 PP-epitope嵌合蛋白的鑒定
        3.3.1 SDS-PAGE和Western Blot檢測(cè)目的蛋白表達(dá)
        3.3.2 嵌合蛋白的定量分析
    3.4 免疫策略
    3.5 血清檢測(cè)與抗體評(píng)估
        3.5.1 免疫血清中結(jié)合抗體的檢測(cè)
        3.5.2 免疫血清中特異性中和抗體的檢測(cè)
        3.5.3 免疫血清的體內(nèi)保護(hù)力評(píng)價(jià)
    3.6 PP-71-6嵌合蛋白結(jié)構(gòu)的表征
        3.6.1 電鏡分析
        3.6.2 3D結(jié)構(gòu)模擬
    3.7 中和表位71-6的鑒定與特征
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]新型人類腸道病毒的研究進(jìn)展[J]. 陳鵬,陶澤新,王海巖,宋艷艷,王顯軍,徐愛強(qiáng).  病毒學(xué)報(bào). 2013(02)
[2]表達(dá)H5N1亞型禽流感病毒HA蛋白的重組鼠白血病病毒的特性[J]. 劉華雷,Rong Li-Jun,周斌,魏建超,鄭其升,陳溥言.  生物工程學(xué)報(bào). 2005(01)



本文編號(hào)：3202392