基于GC/MS技術(shù)的脂肪酸代謝輪廓譜方法和應(yīng)用研究
發(fā)布時(shí)間:2021-05-16 20:01
包含脂肪酸代謝在內(nèi)的脂質(zhì)代謝循環(huán),一直以來就是糖尿病、心血管病等重大疾病發(fā)生機(jī)理的研究熱點(diǎn)。本文采用GC/MS技術(shù)對(duì)脂肪酸代謝組學(xué)進(jìn)行研究。建立了一種脂肪酸代謝輪廓譜方法,詳細(xì)考察了血漿用量、衍生化方法、脂肪酸提取分離、內(nèi)標(biāo)/外標(biāo)法選定等分析條件對(duì)定量結(jié)果的影響。該方法實(shí)現(xiàn)了對(duì)25種酯化脂肪酸(EFAs)和25種非酯化脂肪酸(NEFAs)同時(shí)定性,及其中15種EFAs和15種NEFAs的精確定量。方法學(xué)考察結(jié)果表明,該方法線性良好,相關(guān)系數(shù)大于0.997;日內(nèi),日間RSDs小于15%;脂肪酸加標(biāo)回收率(高、中、低濃度)為80-110%。該法僅需用10μL血漿或血清樣本,較文獻(xiàn)報(bào)道用量(150-300μL)大為減少。將建立的脂肪酸代謝輪廓譜方法用于糖尿病、糖尿病腎病的臨床代謝組學(xué)研究。定量測(cè)定了血漿中15種EFAs和15種NEFAs.基于所得定量數(shù)據(jù),對(duì)脂肪酸總體水平、各類脂肪酸水平、各個(gè)脂肪酸水平以及多個(gè)脂肪酸含量比值等變化進(jìn)行分析,探討了脂肪酸代謝水平變化與糖尿病、糖尿病腎病發(fā)病機(jī)理之間的關(guān)系。采用PLS-DA等模式識(shí)別技術(shù),對(duì)所得脂肪酸測(cè)定結(jié)果進(jìn)行聚類分析,各組樣本聚集成類,體現(xiàn)了...
【文章來源】:華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:125 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 引言
1.1 課題背景
1.2 代謝組學(xué)概述
1.2.1 代謝組學(xué)發(fā)展現(xiàn)狀
1.2.2 代謝組學(xué)及其研究目的和層次
1.2.3 代謝組學(xué)研究?jī)?nèi)容和應(yīng)用
1.2.4 代謝組學(xué)研究方法和流程
1.3 GC/MS技術(shù)及其應(yīng)用
1.3.1 色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)簡(jiǎn)介
1.3.2 氣相色譜分析對(duì)象及其衍生化
1.3.3 質(zhì)譜儀的基本結(jié)構(gòu)和功能
1.3.4 GC/MS的條件優(yōu)化和數(shù)據(jù)采集
1.3.5 GC/MS技術(shù)在代謝組學(xué)研究中的應(yīng)用概況
1.4 本論文的主要內(nèi)容和主要貢獻(xiàn)
1.4.1 本論文的主要內(nèi)容
1.4.2 本論文的主要貢獻(xiàn)和創(chuàng)新點(diǎn)
第2章 血漿/血清脂肪酸GC/MS代謝輪廓譜方法學(xué)的建立
2.1 引言
2.2 實(shí)驗(yàn)部分
2.2.1 試劑
2.2.2 儀器
2.2.3 溶液配制
2.2.4 衍生化方法
2.2.5 血漿樣本的預(yù)處理
2.2.6 數(shù)據(jù)采集和數(shù)據(jù)處理
2.3 結(jié)果和討論
2.3.1 外標(biāo)法的選擇
2.3.2 樣本用量的選擇
2.3.3 衍生化條件的選擇和優(yōu)化
2.3.4 提取分離方法的確定
2.3.5 儀器參數(shù)的優(yōu)化
2.3.6 方法學(xué)考察
2.4 本章小結(jié)
第3章 糖尿病、糖尿病腎病脂肪酸代謝輪廓分析及其用于臨床代謝組學(xué)研究
3.1 背景介紹
3.1.1 代謝綜合征與DM,DN的關(guān)系
3.1.2 DM,DN中的脂代謝紊亂
3.2 人血漿中EFAs和NEFAs定量代謝輪廓研究
3.2.1 實(shí)驗(yàn)部分
3.2.2 人血漿脂肪酸定性、定量結(jié)果
3.2.3 糖尿病、糖尿病腎病的西醫(yī)橫斷面分析及其病理闡釋
3.2.4 糖尿病腎病的中醫(yī)學(xué)分型分析及其病理學(xué)闡釋
3.2.5 糖尿病-糖尿病腎病相關(guān)的中西醫(yī)初步對(duì)比
3.3 本章小結(jié)
第4章 營(yíng)養(yǎng)干預(yù)前后育齡期婦女血清脂肪酸代謝變化研究
4.1 背景介紹
4.2 實(shí)驗(yàn)部分
4.2.1 樣本來源
4.2.2 試劑和材料
4.2.3 儀器
4.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備
4.2.5 樣本預(yù)處理
4.2.6 數(shù)據(jù)采集和數(shù)據(jù)處理
4.3 結(jié)果和討論
4.3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
4.3.2 定量結(jié)果
4.3.3 數(shù)據(jù)處理
4.3.4 營(yíng)養(yǎng)素干預(yù)可能對(duì)脂肪酸代謝及神經(jīng)管閉合造成的影響
4.4 本章小結(jié)
第5章 GC/MS技術(shù)用于其它生物復(fù)雜樣品研究
5.1 GC/MS用于多元醇含量測(cè)定及其微生物發(fā)酵過程控制研究
5.1.1 實(shí)驗(yàn)部分
5.1.2 方法學(xué)考察
5.1.3 結(jié)果和討論
5.1.4 小結(jié)
5.2 川芎當(dāng)歸的揮發(fā)油成分和藥用功效對(duì)比研究
5.2.1 前言
5.2.2 實(shí)驗(yàn)部分
5.2.3 結(jié)果和討論
5.2.4 小結(jié)
5.3 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄:本人攻讀博士期間已發(fā)表和待發(fā)表的論文
附表
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]92例圍產(chǎn)期胎兒神經(jīng)管畸形分析及文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J]. 陳玲玲,楊惠英. 中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志. 2008(04)
[2]代謝組學(xué)技術(shù)及其在臨床研究中的應(yīng)用[J]. 李灝,姜穎,賀福初. 遺傳. 2008(04)
[3]代謝組學(xué)、藥物代謝組學(xué)與中醫(yī)藥現(xiàn)代化[J]. 林景超,李后開,周明眉,賈偉. 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2007(06)
[4]代謝物組學(xué)應(yīng)用的領(lǐng)域之四——毒理代謝物組學(xué)[J]. 吳娟芳,梁瓊麟,冉小蓉,羅國(guó)安,王義明. 中成藥. 2007(02)
[5]代謝物組學(xué)應(yīng)用的領(lǐng)域之五——營(yíng)養(yǎng)代謝物組學(xué)[J]. 冉小蓉,羅國(guó)安,梁瓊麟,溫華珍,王義明. 中成藥. 2007(01)
[6]代謝物組學(xué)應(yīng)用的領(lǐng)域之三——診斷代謝物組學(xué)[J]. 趙基源,梁瓊麟,冉小蓉,羅國(guó)安,王義明. 中成藥. 2006(12)
[7]代謝物組學(xué)應(yīng)用的領(lǐng)域之二——植物代謝物組學(xué)[J]. 劉祥東,羅國(guó)安,王義明. 中成藥. 2006(10)
[8]B超診斷胎兒神經(jīng)系統(tǒng)畸形及臨床意義[J]. 任艷春. 中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志. 2006(07)
[9]代謝組學(xué)在中醫(yī)藥復(fù)雜理論體系研究中的應(yīng)用[J]. 賈偉,蔣健,劉平,趙立平,陳閩軍,周明眉,楊麗萍,王米渠,邱明豐,張永煜. 中國(guó)中藥雜志. 2006(08)
[10]化學(xué)物質(zhì)組學(xué)與中藥方劑研究——兼析清開靈復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)研究[J]. 羅國(guó)安,梁瓊麟,張榮利,王義明,劉清飛,胡坪. 世界科學(xué)技術(shù). 2006(01)
博士論文
[1]疾病代謝物的色譜—質(zhì)譜分析方法研究[D]. 李寧.復(fù)旦大學(xué) 2008
[2]一氧化氮合酶與神經(jīng)管畸形關(guān)系的研究[D]. 胡淑敏.中國(guó)醫(yī)科大學(xué) 2007
[3]復(fù)方川芎當(dāng)歸對(duì)血管細(xì)胞作用機(jī)理[D]. 侯永忠.天津大學(xué) 2004
本文編號(hào):3190310
【文章來源】:華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:125 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 引言
1.1 課題背景
1.2 代謝組學(xué)概述
1.2.1 代謝組學(xué)發(fā)展現(xiàn)狀
1.2.2 代謝組學(xué)及其研究目的和層次
1.2.3 代謝組學(xué)研究?jī)?nèi)容和應(yīng)用
1.2.4 代謝組學(xué)研究方法和流程
1.3 GC/MS技術(shù)及其應(yīng)用
1.3.1 色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)簡(jiǎn)介
1.3.2 氣相色譜分析對(duì)象及其衍生化
1.3.3 質(zhì)譜儀的基本結(jié)構(gòu)和功能
1.3.4 GC/MS的條件優(yōu)化和數(shù)據(jù)采集
1.3.5 GC/MS技術(shù)在代謝組學(xué)研究中的應(yīng)用概況
1.4 本論文的主要內(nèi)容和主要貢獻(xiàn)
1.4.1 本論文的主要內(nèi)容
1.4.2 本論文的主要貢獻(xiàn)和創(chuàng)新點(diǎn)
第2章 血漿/血清脂肪酸GC/MS代謝輪廓譜方法學(xué)的建立
2.1 引言
2.2 實(shí)驗(yàn)部分
2.2.1 試劑
2.2.2 儀器
2.2.3 溶液配制
2.2.4 衍生化方法
2.2.5 血漿樣本的預(yù)處理
2.2.6 數(shù)據(jù)采集和數(shù)據(jù)處理
2.3 結(jié)果和討論
2.3.1 外標(biāo)法的選擇
2.3.2 樣本用量的選擇
2.3.3 衍生化條件的選擇和優(yōu)化
2.3.4 提取分離方法的確定
2.3.5 儀器參數(shù)的優(yōu)化
2.3.6 方法學(xué)考察
2.4 本章小結(jié)
第3章 糖尿病、糖尿病腎病脂肪酸代謝輪廓分析及其用于臨床代謝組學(xué)研究
3.1 背景介紹
3.1.1 代謝綜合征與DM,DN的關(guān)系
3.1.2 DM,DN中的脂代謝紊亂
3.2 人血漿中EFAs和NEFAs定量代謝輪廓研究
3.2.1 實(shí)驗(yàn)部分
3.2.2 人血漿脂肪酸定性、定量結(jié)果
3.2.3 糖尿病、糖尿病腎病的西醫(yī)橫斷面分析及其病理闡釋
3.2.4 糖尿病腎病的中醫(yī)學(xué)分型分析及其病理學(xué)闡釋
3.2.5 糖尿病-糖尿病腎病相關(guān)的中西醫(yī)初步對(duì)比
3.3 本章小結(jié)
第4章 營(yíng)養(yǎng)干預(yù)前后育齡期婦女血清脂肪酸代謝變化研究
4.1 背景介紹
4.2 實(shí)驗(yàn)部分
4.2.1 樣本來源
4.2.2 試劑和材料
4.2.3 儀器
4.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備
4.2.5 樣本預(yù)處理
4.2.6 數(shù)據(jù)采集和數(shù)據(jù)處理
4.3 結(jié)果和討論
4.3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
4.3.2 定量結(jié)果
4.3.3 數(shù)據(jù)處理
4.3.4 營(yíng)養(yǎng)素干預(yù)可能對(duì)脂肪酸代謝及神經(jīng)管閉合造成的影響
4.4 本章小結(jié)
第5章 GC/MS技術(shù)用于其它生物復(fù)雜樣品研究
5.1 GC/MS用于多元醇含量測(cè)定及其微生物發(fā)酵過程控制研究
5.1.1 實(shí)驗(yàn)部分
5.1.2 方法學(xué)考察
5.1.3 結(jié)果和討論
5.1.4 小結(jié)
5.2 川芎當(dāng)歸的揮發(fā)油成分和藥用功效對(duì)比研究
5.2.1 前言
5.2.2 實(shí)驗(yàn)部分
5.2.3 結(jié)果和討論
5.2.4 小結(jié)
5.3 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄:本人攻讀博士期間已發(fā)表和待發(fā)表的論文
附表
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]92例圍產(chǎn)期胎兒神經(jīng)管畸形分析及文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J]. 陳玲玲,楊惠英. 中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志. 2008(04)
[2]代謝組學(xué)技術(shù)及其在臨床研究中的應(yīng)用[J]. 李灝,姜穎,賀福初. 遺傳. 2008(04)
[3]代謝組學(xué)、藥物代謝組學(xué)與中醫(yī)藥現(xiàn)代化[J]. 林景超,李后開,周明眉,賈偉. 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2007(06)
[4]代謝物組學(xué)應(yīng)用的領(lǐng)域之四——毒理代謝物組學(xué)[J]. 吳娟芳,梁瓊麟,冉小蓉,羅國(guó)安,王義明. 中成藥. 2007(02)
[5]代謝物組學(xué)應(yīng)用的領(lǐng)域之五——營(yíng)養(yǎng)代謝物組學(xué)[J]. 冉小蓉,羅國(guó)安,梁瓊麟,溫華珍,王義明. 中成藥. 2007(01)
[6]代謝物組學(xué)應(yīng)用的領(lǐng)域之三——診斷代謝物組學(xué)[J]. 趙基源,梁瓊麟,冉小蓉,羅國(guó)安,王義明. 中成藥. 2006(12)
[7]代謝物組學(xué)應(yīng)用的領(lǐng)域之二——植物代謝物組學(xué)[J]. 劉祥東,羅國(guó)安,王義明. 中成藥. 2006(10)
[8]B超診斷胎兒神經(jīng)系統(tǒng)畸形及臨床意義[J]. 任艷春. 中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志. 2006(07)
[9]代謝組學(xué)在中醫(yī)藥復(fù)雜理論體系研究中的應(yīng)用[J]. 賈偉,蔣健,劉平,趙立平,陳閩軍,周明眉,楊麗萍,王米渠,邱明豐,張永煜. 中國(guó)中藥雜志. 2006(08)
[10]化學(xué)物質(zhì)組學(xué)與中藥方劑研究——兼析清開靈復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)研究[J]. 羅國(guó)安,梁瓊麟,張榮利,王義明,劉清飛,胡坪. 世界科學(xué)技術(shù). 2006(01)
博士論文
[1]疾病代謝物的色譜—質(zhì)譜分析方法研究[D]. 李寧.復(fù)旦大學(xué) 2008
[2]一氧化氮合酶與神經(jīng)管畸形關(guān)系的研究[D]. 胡淑敏.中國(guó)醫(yī)科大學(xué) 2007
[3]復(fù)方川芎當(dāng)歸對(duì)血管細(xì)胞作用機(jī)理[D]. 侯永忠.天津大學(xué) 2004
本文編號(hào):3190310
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