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過表達CXCR4/CXCR7影響人臍帶間充質(zhì)干細胞遷移和增殖

發(fā)布時間:2021-05-07 08:48
  目的探討SDF-1/CXCR4及SDF-1/CXCR7對人臍帶間充質(zhì)干細胞(h UC-MSCs)遷移和增殖活性的影響。方法用Ad-EASY腺病毒質(zhì)粒系統(tǒng)分別構(gòu)建表達CXCR4和CXCR7的重組腺病毒,感染h UC-MSCs后用FCM分別檢測細胞膜的CXCR4和CXCR7受體的表達,Transwell法檢測細胞遷移,MTT檢測h UC-MSCs增殖活性,以及在H2O2誘導細胞毒性作用對細胞存活的影響。結(jié)果成功構(gòu)建表達人源的CXCR4和CXCR7的重組腺病毒,感染后h UC-MSCs細胞膜上的CXCR4/CXCR7受體陽性表達率分別達到93.7%和78.5%(P<0.01),高表達CXCR4和CXCR7均顯著增強SDF-1誘導的h UC-MSCs細胞遷移,其中CXCR7效應稍弱;高表達CXCR7而不是CXCR4顯著提高SDF-1誘導的h UC-MSCs增殖活性和氧化應激狀態(tài)下的細胞存活率(P<0.05)。結(jié)論 CXCR4/CXCR7均參與介導了SDF-1誘導的h UC-MSCs細胞遷移作用,同時CXCR7還介導了SDF-1誘導的h UC-MSCs增殖和H2O2處理損傷的保護。 

【文章來源】:基礎醫(yī)學與臨床. 2016,36(10)CSCD

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 重組腺病毒載體p Ad-CXCR4/p Ad-CXCR7的構(gòu)建:
        1.2.2 重組腺病毒Ad-CXCR4/Ad-CXCR7的包裝:
        1.2.3 檢測重組腺病毒感染h UC-MSCs后熒光表達:
        1.2.4 流式細胞術(shù)檢測h UC-MSCs胞膜CXCR4/CXCR7的表達:
        1.2.5 Transwell檢測CXCR4/CXCR7對h UC-MSCs遷移能力的影響:
        1.2.6 MTT法檢測CXCR4/CXCR7對h UC-MSCs增殖活性的影響:
        1.2.7 MTT法檢測CXCR4/CXCR7對h UC-MSCs在氧化應激狀態(tài)下細胞存活率的影響:
    1.3 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
    2.1 重組腺病毒質(zhì)粒p Ad-CXCR4/p Ad-CXCR7的構(gòu)建及鑒定
    2.2 重組腺病毒的包裝、擴增及細胞感染率的檢測
    2.3 FCM檢測h UC-MSCs細胞膜受體CXCR4/CXCR7的表達
    2.4 SDF-1/CXCR4/CXCR7對h UC-MSCs遷移能力的影響
    2.5 SDF-1/CXCR4/CXCR7對h UC-MSCs細胞增殖的影響
    2.6 SDF-1/CXCR4/CXCR7對h UC-MSCs細胞存活的影響
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]BMSCs膜受體CXCR4和CXCR7表達及其在骨創(chuàng)傷修復中的作用[J]. 李芳菲,張波,劉蘋,翁土軍,羅剛,鄧蔓菁.  中華創(chuàng)傷雜志. 2014 (12)



本文編號:3173108

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