發(fā)布時間：2021-04-28 13:47

　　目的：利用ROP16Ⅰ/Ⅲ基因真核表達(dá)重組質(zhì)粒免疫BALB/c雌性小鼠,檢測小鼠體液免疫和細(xì)胞免疫,評估ROP16Ⅰ/Ⅲ,作為潛在的分子疫苗的價值。方法：克隆Chinese 1型弓形蟲ROP16Ⅰ/Ⅲ,將其插入真核表達(dá)載體pEGFP-C2中構(gòu)建重組質(zhì)粒pEGFP-ROP16Ⅰ/Ⅲ,脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染T293細(xì)胞并觀察體外表達(dá)。Western blotting分析鑒定。將36只SPF級小鼠隨機(jī)均分為：①PBS組；②空質(zhì)粒組；和③EGFP-ROP16Ⅰ/Ⅲ組。每2W肌注免疫1次（100 μ g/只）,共3次；于免疫前及每次肌注前1d和末次免疫后2W收集小鼠血清,間接ELISA法檢測血清抗弓形蟲IgG。于末次免疫2w后取小鼠脾臟,分離淋巴細(xì)胞培養(yǎng)測細(xì)胞因子。剩余小鼠腹腔注射Chinese 1型弓形蟲Wh3株速殖子1000個/每只,觀察小鼠攻擊感染后的存活時間和存活率。結(jié)果：真核表達(dá)載體構(gòu)建成功,體外見到重組質(zhì)粒pEGFP-ROP16Ⅰ/Ⅲ在T293細(xì)胞的表達(dá)；pEGFP-ROP16Ⅰ/Ⅲ末次免疫后血清中IgG水平及脾淋巴細(xì)胞細(xì)胞因子均無明顯升高（P>0.05）；攻擊感染后,免疫組小鼠比對照組... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
中英文縮略詞對照表（Abbreviation)
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄一
    附錄二
    附錄三 致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3165586