發(fā)布時間：2021-04-08 05:26

　　目的:通過BALB/c小鼠腓腸肌部位注射促甲狀腺素受體（thyrotropin receptor,TSHR）膜外區(qū)A亞單位重組質(zhì)粒pcDNA3.1/TSHR268,構(gòu)建Graves病（Graves disease,GD）小鼠模型,特別是觀測其Graves眼�。℅raves ophthalmopathy,GO）的發(fā)生特點,探討GD伴GO BALB/c小鼠模型的疾病特征。方法:1、大量制備本實驗室保存的TSHR膜外區(qū)A亞單位重組質(zhì)粒pcDNA3.1/TSHR268,并進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction,PCR）鑒定。2、實驗小鼠隨機(jī)分為三組,造模組在BALB/c小鼠雙側(cè)腓腸肌各注射50μg/50μL質(zhì)粒,立即在注射部位電穿孔以增強(qiáng)轉(zhuǎn)染免疫效果,對照組注射50μL無菌生理鹽水并電穿孔,空白組注射50μL無菌生理鹽水。分別在第1、4、7、10周對小鼠進(jìn)行免疫。3、分別在第0、3、6、9、12、15、18周取小鼠內(nèi)眥靜脈血檢測血清甲狀腺素（thyroxine,T₄）、促甲狀腺素（thyroid stimulating hormone,TSH... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

重組質(zhì)粒pcDNA3.1/TSHR268PCR鑒定

從表 1、圖 2 可以看出，實驗組小鼠血清 T4水平經(jīng) 2 次免疫后（6 周高，從免疫前的 10.37±5.11 ng/mL 升至 27.44±9.36 ng/mL（P<0.01），從8 周，實驗組 T4明顯高于對照組和空白組（P<0.01），說明實驗組處于。對照組和空白組在各個階段血清 T4水平未見明顯差異（P>0.05）。表 2 BALB/c 小鼠 TSH 變化情況（單位：μIU/mL）實驗組 對照組 空白組周 2.74±0.58 2.64±0.61 2.79±0.71周 2.93±0.72 2.47±0.88 3.05±0.36周 1.88±0.65* 3.74±0.67 2.76±0.97周 0.21±0.06* 4.34±0.73 1.76±0.59 周 0.05±0.02* 5.11±0.98 4.23±0.36 周 0.05±0.03* 2.67±0.56 2.58±0.65 周 0.05±0.01* 4.27±0.35 3.57±0.69

表 2、圖 3 顯示，實驗組小鼠血清 TSH 水平在第 2 次免疫后（6 周）有較下降，從免疫前的 2.74±0.58 μIU/mL 下降至 1.88±0.65μIU/mL（P<0.01） 6 周-18 周，實驗組 TSH 明顯低于對照組和空白組（P<0.01），符合甲亢對照組和空白組在各個階段血清 TSH 水平未見明顯差異（P>0.05）。BALB/c 小鼠血清 TSAb（表 3、圖 4）、TSBAb（表 4、圖 5）測定。表 3 BALB/c 小鼠 TSAb 變化情況（單位：μIU/mL）實驗組 對照組 空白組周 3.11±1.32 2.87±2.11 3.08±1.96周 5.49±2.08 3.75±1.49 3.14±1.11周 98.46±13.12* 4.08±2.11 3.77±0.94周 375.19±42.09* 6.16±2.79 4.38±1.93 周 542.22±47.83* 7.51±4.19 4.13±2.00 周 516±47.12* 5.79±3.03 5.72±2.88


本文編號：3124937