目的:觀察肺炎克雷伯菌夾膜多糖（CPS）對人肺上皮細(xì)胞表達(dá)短腭、肺及鼻咽上皮克隆1（SPLUNC1）的影響,并探討其在介導(dǎo)細(xì)胞因子分泌中的作用。方法:培養(yǎng)肺炎克雷伯菌并提取其CPS,將其與體外培養(yǎng)人肺上皮細(xì)胞系NCI-H292孵育。實時定量PCR和ELISA檢測SPLUNC1蛋白和mRNA表達(dá)的影響。提取細(xì)胞核蛋白,ELISA測定CPS處理前后NF-κB活性的變化,采用Western blot檢測IκB的表達(dá),并采用NF-κB抑制劑PDTC預(yù)處理,觀察其在SPLUNC1表達(dá)中的作用。ELISA檢測CPS處理前后培養(yǎng)上清TNF-α和IL-8分泌的變化;并采用siRNA沉默NCI-H292細(xì)胞SPLUNC1,觀察其對TNF-α和IL-8分泌的影響。結(jié)果:實時定量PCR結(jié)果顯示,0.5～3μg/ml CPS處理后,SPLUNC1 mRNA水平明顯增高,并呈一定的劑量依賴性,ELISA也得到了類似的結(jié)果。0.5～3μg/ml CPS也能激活NF-κB,主要表現(xiàn)在NF-κB的DNA結(jié)合活性增高、IκB表達(dá)減少。同時,CPS也能誘導(dǎo)肺上皮細(xì)胞分泌TNF-α和IL-8,采用NF-κB抑制劑PDTC預(yù)... 

【文章來源】：中國免疫學(xué)雜志. 2019,35(22)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

不同濃度CPS對SPLUNC1 mRNA和蛋白表達(dá)的影響

不同濃度莢膜多糖激活NF-κB

夾膜多糖誘導(dǎo)NCI-H292細(xì)胞分泌TNF-α和IL-8


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