研究背景:肺炎克雷伯菌（Klebsiella Pneumoniae,KP）是一種較短粗的革蘭陰性桿菌,無(wú)芽胞,無(wú)鞭毛,有較厚的莢膜,多數(shù)有菌毛。肺炎克雷伯菌是人類(lèi)正常微生物菌群主要的組成細(xì)菌之一,同時(shí)也是一種機(jī)會(huì)致病菌,當(dāng)機(jī)體免疫力低下時(shí)可逃避宿主免疫反應(yīng)而致病。肺炎克雷伯菌能夠擾亂正常的微生物菌群并在胃腸中進(jìn)行初始定植同時(shí)抑制宿主免疫。自20世紀(jì)70年代以來(lái),由于抗生素濫用導(dǎo)致多種細(xì)菌出現(xiàn)廣泛耐藥性,近年來(lái)多重耐藥致病菌的數(shù)量急劇增加。多重耐藥的肺炎克雷伯菌感染是全球醫(yī)院感染的主要病因之一,在住院患者中易引起尿路感染、肺炎和腹腔內(nèi)感染,尤其在醫(yī)院重癥監(jiān)護(hù)病房革蘭氏陰性菌感染中,約15%是由多重耐藥肺炎克雷伯菌引起。1996年Mackenzie等首次報(bào)道耐碳青霉烯類(lèi)肺炎克雷伯菌（Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP）,隨后CRKP陸續(xù)在美國(guó)、英國(guó)、雅典、中國(guó)等地被發(fā)現(xiàn)。碳青霉烯酶是肺炎克雷伯菌對(duì)碳青霉烯類(lèi)藥物耐藥的主要原因,它能夠有效的水解青霉素、頭孢菌素、氨曲南、碳青霉烯類(lèi)等多種抗生素。碳青霉烯酶的相關(guān)耐藥基因主要位于質(zhì)粒和轉(zhuǎn)... 

【文章來(lái)源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)生活史在實(shí)驗(yàn)室中，線(xiàn)蟲(chóng)通常在含有大腸桿菌菌苔的瓊脂平板上生長(zhǎng)，當(dāng)細(xì)菌消耗殆盡，可利用自身的脂肪供應(yīng)

圖 2 不同培養(yǎng)條件對(duì) CRKP 感染后線(xiàn)蟲(chóng)存活率的影響蟲(chóng)-CRKP 感染模型中感染濃度的選擇顯微鏡下觀(guān)察未感染的線(xiàn)蟲(chóng)呈正弦運(yùn)動(dòng)，并伴有口咽部的活動(dòng)（圖 3A）；的線(xiàn)蟲(chóng)，其腸道明顯膨脹，身體呈僵直不動(dòng)的狀態(tài)，無(wú)口咽部的活動(dòng)（圖 3觀(guān)察到感染和未感染的線(xiàn)蟲(chóng)行為學(xué)出現(xiàn)明顯改變，感染后的線(xiàn)蟲(chóng)不能馬上達(dá)態(tài)，往往處于一種緩慢致死的虛弱狀態(tài)。用不同濃度的 CRKP 感染線(xiàn)蟲(chóng) 36 小時(shí)后，觀(guān)察線(xiàn)蟲(chóng)的活動(dòng)情況。在不同的（108cfu/mL、 107cfu/mL、 106cfu/mL、 105cfu/mL、空白對(duì)照組）下，最活動(dòng)的線(xiàn)蟲(chóng)分別為 7.84% 、3.448%、6.667%、3.7%、100%（圖 3C）。各陰性對(duì)照組相比均具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=56.44 P<0.0001），不同起始對(duì)于線(xiàn)蟲(chóng)均能達(dá)到初步感染的目的，使線(xiàn)蟲(chóng)自主活動(dòng)喪失。其中 108cfu/m半數(shù)線(xiàn)蟲(chóng)出現(xiàn)自主運(yùn)動(dòng)消失的初步感染時(shí)間大約為 9h、 107cfu/mL 感染組106cfu/mL、105cfu/mL 組分別為 15h、18h。為盡可能縮短試驗(yàn)用時(shí)同時(shí)控制生長(zhǎng)繁殖，選擇 106cfu/mL 終濃度為試驗(yàn)起始菌液濃度。

A：感染前線(xiàn)蟲(chóng)的形態(tài)（10X）； B：感染后線(xiàn)蟲(chóng)的形態(tài)（10X）；C：不同菌量的 CRKP 感染線(xiàn)蟲(chóng)后線(xiàn)蟲(chóng)的生存曲線(xiàn)圖 3 不同濃度 CRKP 感染的秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)生存曲線(xiàn)KP 感染線(xiàn)蟲(chóng)后細(xì)菌在體內(nèi)的分布一步證實(shí)線(xiàn)蟲(chóng)腸道的膨脹是由于 CRKP 的定植，實(shí)驗(yàn)采用細(xì)胞熒光標(biāo)P、OP50，來(lái)找到細(xì)菌作用于線(xiàn)蟲(chóng)的可能感染路徑。兩組均與線(xiàn)蟲(chóng)共培光顯微鏡觀(guān)察菌體在線(xiàn)蟲(chóng)中的分布。結(jié)果表明，對(duì)照組線(xiàn)蟲(chóng)未出現(xiàn)細(xì)長(zhǎng)。（圖 4A），而感染后的線(xiàn)蟲(chóng)腸道內(nèi)充滿(mǎn)了進(jìn)食后標(biāo)記了紅色致腸腔膨脹（圖 4B、C）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)-泛耐藥肺炎克雷伯菌感染模型的建立[J]. 王訊,孫樹(shù)梅,歐陽(yáng)妮,張亞莉,芮勇宇.  中國(guó)感染控制雜志. 2016(07)
[2]秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)-白念珠菌感染模型用于抗真菌藥效評(píng)價(jià)的研究[J]. 畢爽,胡淦海,胡丹丹,姜遠(yuǎn)英,王彥.  中國(guó)真菌學(xué)雜志. 2016(03)
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